【摘要】 对于儿茶酚胺的测定所采用的检测器固定波长和可变波长的紫外检测器是广泛应用的检测器,CA及有关化合物的检测波长为254nn或280nm,使用较多的为280nm,检测灵敏度可达ng水平。

对于儿茶酚胺的测定所采用的检测器固定波长和可变波长的紫外检测器是广泛应用的检测器,CA及有关化合物的检测波长为254nn或280nm,使用较多的为280nm,检测灵敏度可达ng水平。CA是一类极性物质,具有氮基和酚羟基,常用离子交换色谱和离子对色谱分离。离子交换色谱分离效果不佳,而正相离子对色谱固定液容易流失影响分离的重现性,目前最为有效的分离方法为皂法色谱和反相离子对色谱。皂法色谱是以三甲基氯硅处理的十八烷基键合硅胶(ODS/TMS硅胶)为填料,在一般常用的反相色谐的洗脱液中加入少量的表面活性剂,浓度在0.1%以下,分离效果比离子交换法明显提高,12.5cm的短柱理论塔板数一般可达3000一5000板,最高达10,00o板。常用的表面活性剂有十二烷基磺酸钠(SDS)、十二烷基硫酸钠(SLS)和十二烷基苯磺酸钠(SDBS)。用此法一次分离了十二种CA及有关化合物,分离效果好,峰形窄,对称性好。

 

反相层析其有重现性好,分离效果好和使用简便等优点,但极性大的物质往往保留时间短或无保留随溶剂峰一起出现,无法使用。以纯水为洗脱液的反相色谐分离极性物质如CA及代谢产物得到满意的结果R,洗脱液的p汨值调节适合一次分离可同时测定CA及其酸性代谢产物。紫外检测器灵敏度较低,一般不适用于生物样本中CA的测定,但对于药物制剂中含量的测定极为方便。

 

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