【摘要】 荧光胺和某些CA反应时,反应溶液缓冲剂的种类和pH值对产生的荧光强度有很大影响。

荧光胺和某些CA反应时,反应溶液缓冲剂的种类和pH值对产生的荧光强度有很大影响。荧光胺同DA和NA在硼酸缓冲液中反应的产物只有微弱的荧光,而在磷酸缓冲液中反应的产物荧光强度可以提高几十倍,大大提高检测的灵敏度,见图8-9。荧光胺的衍生物曾用于生物样本DA和NA的测定",图8-10为大鼠脑样本CA的测定。

 

荧光衍生法湖定CA虽然灵敏度较高,但在分离前需要制备荧光衍生物操作比较麻烦,不适于常规分析用。因此在方法和仪器的改进方面进行了新的探索(1~8],最沂CA的自动荧光检测仪已经研制成功,使分离、制备衍生物和检测自动连续进行,检测极限可达几十Pg可以满足生物样本的测定。

 

电化学检测器具有高灵敏度和高选择性,适合于生物样本中CA的测定,面且不需要制备特殊的衍生物,比荧光衍生法简单,灵敏度高。几年来经过方法和仪器的不断改进,已成功地应用于小便、血液和组织样本CA及其代谢产物的定量测定,定量测定的最低限度为pg水平。

 

CA是一类极性物质,而电化学检测法也要求在水溶液系统中进行,分离方法使用最多的是离子交换层析。临床上曾用这种方法定量测定小便中的NA、A、DA 和LD。在良好的操作条件下样品经预处理后一次分离测定四种成分只需10分钟(1°,小便样本需要量为3ml,进样量可以在ng/ml 以下。使用同样方法也可以测定血清中的DA 和LD的含量,样品浓度在50ug /L~10mg/L之间峰高和浓度间有良好的线性关系,可用于定量测定。

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.

 

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