【摘要】 扫描电镜可以用来观察生物样品表面的细小形态特征，比光学显微镜能观察到更详细更细微的结构，是生物学研究的重要手段。

扫描电镜可以用来观察生物样品表面的细小形态特征，比光学显微镜能观察到更详细更细微的结构，是生物学研究的重要手段。为了得到更清晰更真实的扫描电镜观察结果，样品的制备过程比较关键。

 

生物样品的含水量一般为70% ~ 80% ,仅有少数样品如毛发、牙齿角质以及含水量极低的昆虫等可以直接喷镀观察绝大多数的生物样品均要求经过干燥处理才能镀金和进行扫描电镜观察。干燥是扫描电镜生物样品制备中的关键环节如果处理不好会直接影响到观察的清晰度与准确度甚至直接导致试验失败。要想制备出好的扫描电镜生物样品要求在干燥过程中尽可能减少由于水分蒸发而引起的样品表面形貌的变形，如体积变化、结构皱缩或干裂等。且必须确保干燥彻底。大多数动植物特别是柔软的细胞和组织在干燥时由于体积应力和表面张力的作用,容易发生明显的塌陷和变形。因此需要针对不同的生物样品来选择合适的干燥方法在样品不受或少受表面张力等因素的影响下不变地将液体去掉,达到干燥的目的。

 

近年来出现了环境扫描电镜和冷冻扫描电镜等可观察含水样品的扫描电镜，但观察方法的分辨率较低。

 

干燥的方法很多,比如临界点干燥法、自然干燥法、冷冻干燥法、叔丁醇真空干燥法、六甲基二硅胺烷干燥法，乙腈干燥法、烘干干燥法、氮气干燥法和微波干燥法等。这些方法各有利弊,且适用样品种类不同。因此根据生物样品的特性选择一种适宜的干燥方法十分重要。

 

对于常规的扫描电子显微镜来说，用于观察的样品必须是干燥的。含有水分的样品在扫描电镜的真空镜筒中会造成很多不良影响：

 

(1)样品收到电子束轰击后会产生的水蒸气会遭遇电子流，引起电子流大幅度波动，使图像模糊出现雾状，甚至根本不能无法成像。

 

(2)大多数样品在高真空中容易发生形态损伤，使得研究特征皱缩，变形。

 

(3)会造成物镜、镜头、光阑等的污染。

 

(4)灯丝遇到水蒸气会氧化变质甚至熔断。

 

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