【摘要】 肾脏疾病的一个主要原因是肾小球损伤,肾小球是滤过器。

与人类相似,狗也会患上肾脏疾病,导致血液和尿液的特殊变化[1]。肾脏疾病的一个主要原因是肾小球损伤,肾小球是滤过器。肾小球损伤可继发于自身免疫过程或非免疫介导机制。使用透射电子显微镜(TEM)进行超微结构评估是评估肾小球的主要方法之一[2]。直到最近,还很难及时正确诊断犬肾小球疾病,从而允许进行介入治疗。因此,TEM对犬肾小球的评估仅限于具有明显组织降解和“终末期肾病”的尸检标本[3] 国际兽医肾脏病理服务(IVRPS)成立于2005年,作为诊断猫狗肾活检材料的概念验证模型。我们的假设是,犬肾小球的TEM检查提高了肾活检评估的诊断准确性,一些疾病需要TEM诊断。为了更好地描述和分类犬肾小球疾病,IVRPS建立了组织收集协议,包括在3%戊二醛、米歇尔传输介质(用于免疫荧光,IF)和福尔马林中提交样本。俄亥俄州立大学比较小鼠表型共享资源实验室对样本进行常规光镜(LM)、透射电镜(TEM)和IF处理。具体而言,TEM样本嵌入epon块中,以1µm厚切片,并用托鲁定蓝染色以识别肾小球区域。然后将感兴趣的区域进一步切片至55-60nm厚,放置在铜网格上,用醋酸铀酰和柠檬酸铅染色,然后在俄亥俄州立大学医学院肾脏病理学中心使用JOEL-JEM-1400透射电子显微镜进行检查。根据IVRP的工作流程,LM诊断比TEM诊断更早进行。在24个月的时间里,本研究纳入了LM评估不足的病例。对病理报告和组织标本进行回顾性审查,以确定哪些类型的肾小球病变需要TEM进行最终诊断,并确定TEM导致LM诊断逆转的病例。在2年的时间里,共有318份犬肾脏标本通过IVRPS进行了评估。在接受肾组织后24至72小时内进行LM诊断,而TEM评估在1至3周内进行(平均14天)。41例最终诊断需要TEM,占IVRPS检查的所有犬科病例的13%。需要TEM的这一比例低于先前报道的501份肾标本研究中25%的病例。1 41例中有27例(66%)为不涉及免疫复合物沉积的疾病,其余14例(34%)为免疫复合物介导的肾小球肾炎。这两类疾病之间的区别对于决定是否需要免疫抑制至关重要[4]。TEM导致7例LM诊断逆转。在这些特殊情况下,LM诊断的可信度很高,TEM结果出乎意料。在13例病例中,TEM有助于诊断兽医学认为罕见的疾病(如微小病变、系膜增生性肾小球肾炎和血栓性微血管病)。在兽医诊断实验室环境中使用TEM是可行的,诊断平均在2周内完成。TEM评估提高了诊断准确性:它允许区分两种主要疾病类别,并影响治疗计划。此外,它是诊断罕见兽医疾病所必需的。最后,在一小部分病例中,TEM导致LM诊断的逆转[5]

图1 来自犬肾小球活检的TEM图像示例。A) LM评估没有发现任何损伤,需要TEM来诊断足细胞和壁上皮细胞的损伤(*)。B) 当通过TEM发现意外的电子致密沉积物(箭头)时,LM评估发生逆转。C) TEM诊断为严重的肾小球基底膜异常,诊断为一种罕见疾病

 

参考文献

[1] Schneider SM, et al, J Vet Intern Med. Nov-Dec;27 Suppl 1 (2013), p. S67.  

[2] Walker P., Arch Pathol Lab Med. 133(2) (2009), p. 181.

[3] MacDougall DF, et al, Kidney Int. 29 (1986), p. 1144.  

[4] Cowgill LD, et al. J Vet Intern Med 27 (2013), p. S44.  

[5] The author graciously recognizes the work of the Comparative Mouse Phenotyping Shared Resource at the  Ohio State University

 

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