【摘要】 胰岛素(Insulin) 系由两条肽链组成的一种多肽激素,由家畜的胰脏提出。

胰岛素(Insulin) 系由两条肽链组成的一种多肽激素,由家畜的胰脏提出。胰岛素为白色结晶性粉末,可与锌结合成结晶体胰岛素。胰岛素易受消化酶作用而失效,作用时间较长的为精蛋白锌胰岛素.胰岛素的测定方法有生物测定法.免疫测定法等。HPLC法以其快速、准确、灵敏度高、重现性好等优点在胰岛素的测定尤其是降解产物的分离等方面得到广泛应用,其中有RP-HPLC、凝胶过滤等方法,所用色谱柱为C18、C8、苯基、PSDVB柱等;流动相多使用盐缓冲液、梯度洗脱;检测方法可用紫外法,;组织中胰岛素用超声均化、离心处理,或用醋酸提取,固相萃取柱也有使用。利用分离效果好的RP-HPLC可以比较不同动物种属的胰岛素肽链间的差别;还可研究在蛋白双硫异构酶作用下天然胰岛素的形成过程(50);胰岛素及其制剂的稳定性及降解产物的HPLC研究报道很多。凝胶过滤法用GPC100胶可提取细胞法合成的胰岛素,将胰岛素与其它蛋白加以分离; Zorbax GF -250凝胶柱也有应用。

缩宫素(Oxytocin)由猪、牛、羊等动物脑垂体后叶提取或化学合成制得的,肽链由九个氨基酸组成。缩宫素为白色粉末,能溶于水,易溶于醋酸溶液,在酸性介质中较稳定。缩宫素的测定可用生物法、放射免疫法。生物法费时、灵敏度低、重现性差;放射免疫法操作繁琐。液相色谱已越来越多地用于缩宫素的分析.所用色谱柱有C18。柱、分子筛柱;流动相用缓冲液,分离混合物用梯度洗脱;紫外检测的最低检出量为40pg;检测波长为200~ 220nm,其它杂质对测定有影响;通过OPA、荧光胺柱前或柱后衍生化用荧光检测,可使灵敏度获得很大提高;库仑检测器也有较高灵敏度。生物样品可经固相萃取,免疫亲合色谱纯化。

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