【摘要】 体外测定微生物对药物敏感程度的实验,称为抗菌实验,分为抑菌实验和杀菌实验,前者是抑制细菌的生长繁殖,但不能杀菌,在药物去除后,微生物还可以继续生长;后者是能杀死微生物,在药物去除后,微生物不能再生长繁殖。
一、简介
体外测定微生物对药物敏感程度的实验,称为抗菌实验,分为抑菌实验和杀菌实验,前者是抑制细菌的生长繁殖,但不能杀菌,在药物去除后,微生物还可以继续生长;后者是能杀死微生物,在药物去除后,微生物不能再生长繁殖。
二、抗菌实验检测方法
1.液体培养抑菌检测(OD值测量 )
实验操作: 分别于LB培养基中220 rpm ,37℃条件下培养大肠杆菌DH5α至OD600为0.6左右,对应108个CFU/mL的浓度,按1:1000的稀释比例将菌液稀释至终浓度为105个CFU/mL,分别将15w紫外照射灭菌20分钟的待测样品加入到3 mL的菌液中(每组设定两个平行重复,样品均完全浸没于菌液中),37℃,220 rpm条件下培养24 h后测定OD值。
对接注意事项:1.样本自带对于OD测试有有影响的因素,对于实验结果有影响;2.默认三次重复,确认待测样本的实验用量;3.对于块体样本,计算好客户提供样本数量。
2.固体平板培养基抑菌检测(抑菌圈测量)
实验操作:分别于LB培养基中220 rpm ,37℃条件下培养大肠杆菌DH5α至OD600为0.6左右,108个CFU/mL的浓度,以1:1000的体积比将菌液和融化的固体培养基混合,每个培养皿(直径为90 mm)中倒入10 mL混合培养基,凝固后备用。分别加入待测样品,37℃培养24小时候拍照。
实验方法: a.直接接触法;b.滤纸片法;c.打孔法;d.挖沟法
关于抗菌试验检测的方法我们下期继续介绍。
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