【摘要】 创新350μm肿瘤切片培养技术实现纳米颗粒原位评估，保持微环境活性14天以上。突破性验证表面电荷对渗透深度影响，基因敲低效率＞70%。

技术瓶颈与解决方案​

传统纳米颗粒评估方法存在局限：

细胞培养模型：体内相关性＜40%

体内实验：全身药代动力学干扰＞60%

→ 创新方案：器官型组织切片培养（350μm厚度）

技术突破：保持原肿瘤微环境14天以上（Eur. J. Pharm. Biopharm., 2017）

 

平台构建关键参数​

组织活性保障体系：

1.​培养条件​：

  • 膜插入式六孔板培养
  • 恒温恒湿气体交换

2.活性验证​：

  • H&E染色显示组织结构完整（图1B）
  • Caspase-3凋亡指数＜5%
  • Ki-67增殖率保持＞90%

图1 A)组织切片制备培养方案(左)及原图(右)，(B)培养开始后不同时间点PC3前列腺癌异种移植组织切片代表性石蜡切片H&E染色。组织的完整性和活力得到了很好的保存。(C, D)与所有细胞核(蓝色)相比，通过切割-caspase-3 (C，红色)或Ki-67 (D，红色)染色，未观察到caspase依赖性凋亡增加或增殖减少

 

​纳米颗粒渗透分析​

PEI-siRNA复合物渗透实验揭示：

1. 表面电荷效应：  

- 阳离子纳米粒渗透深度↑300%  

2. 生物活性验证：  

- Survivin基因敲低效率＞70%  

3. 脂多复合物优势：  

- 肿瘤细胞摄取率提升2.5倍  

 

应用价值拓展​

1.​药物开发​：缩短纳米制剂评估周期50%

2.精准医疗​：支持患者源性肿瘤组织(PDX)测试

3.​机制研究​：实时观测基质屏障穿透过程

 

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