【摘要】 蛋白质印迹(Western Blot)是免疫遗传学和生物化学中常用的一种分析和鉴定特定蛋白质的方法。
蛋白质印迹(Western Blot)是免疫遗传学和生物化学中常用的一种分析和鉴定特定蛋白质的方法。1979年瑞士米歇尔弗雷德里希生物研究所的Harry Towbin首次提出了蛋白质印迹法,1981年Neal Burnette在《分析生物化学》中首次将蛋白质印迹法命名为Western Blot。它是将蛋白质在凝胶板上进行单向或双向电泳,用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,转移到硝酸纤维素薄膜上,这种固相载体能够以非共价键形式吸附蛋白质,并保持电泳分离的多肽产物类型及其生物学活性不变。利用特异性抗体或同位素标记的第二抗体对蛋白质进行免疫反应着色,以显示膜上特定的蛋白条带,通过分析着色的位置和着色深度,获得细胞或组织中特定蛋白质表达的信息,还可以运用底物显色或放射自显影来以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
蛋白质印迹法测试是一种人工模拟的抗体,与生物抗体相比较,其能在苛刻的条件下操作,具有制作成本低、可重复使用、耐高温、酸、碱等优点。
蛋白质模拟抗体取代生物分子作为仿生传感器识别元件,将会在在医学、食品检测及生物领域发挥巨大作用;人工模拟抗体代替生物抗体,建立类似于放射免疫或酶联免疫的免疫检测模式,用来对人体及动物体液或组织中生物大分子进行分离和检测,将会使免疫检测技术获得突破性进展。除此之外,蛋白质印迹技术在色谱分离、固相萃取、膜分离等技术中也将得到广泛应用,并对众多领域特别是医学诊断和食品安全检测领域意义重大。
参考文献:
[1]秦红, 韩剑众. 蛋白质印迹技术研究进展及应用前景[J]. 食品科学, 2007, 28(8):4.
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