【摘要】 紫外测试模式分为透过和反射。透过模式时，样品置于光源与检测器之间，Y轴数据通常用吸光度（A）或透光率（T%）表示。透过模式样品必须透光，如液体或者透明薄膜。反射模式时，样品置于积分球检测器末端，Y轴数据通常用吸光度（A）或相对反射率（R%）表示。反射模式适合测试不透光的样品，如粉末、块体等。

常见问题一：测试模式、波长范围的选择

 

紫外测试模式分为透过和反射。透过模式时，样品置于光源与检测器之间，Y轴数据通常用吸光度（A）或透光率（T%）表示。透过模式样品必须透光，如液体或者透明薄膜。反射模式时，样品置于积分球检测器末端，Y轴数据通常用吸光度（A）或相对反射率（R%）表示。反射模式适合测试不透光的样品，如粉末、块体等。

 

因此，要根据样品选择合适的测试模式。粉末、大的块体、不透明薄膜一般不测透过率，没有意义。测试波长范围可根据样品的吸收、漫反射情况决定，如若不清楚样品情况，可选择全波长扫描。

 

常见问题二：未适时做归一化处理

 

液体样浓度不同、粉末取样质量不同，测试获得的吸收谱（反射谱）对应的吸光度（反射率）就不一样。其中，反射率测试时，要求样品量足够多，反射面大于光斑大小。在紫外数据分析时，为了减少样品自身浓度和用量的影响，通常会选择将图谱做归一化处理，更直观比较不同样品的光谱规律。对于同一液体样品，吸光度理论上和浓度成正比。不同浓度液体样品，吸光度值不一样，但吸收曲线类似，峰位保持不变。Origin的归一化处理教程可网上自行搜索。

 

常见问题三：光源、检测器切换造成的信号跳跃

 

仪器测试中，存在光源、检测器的切换过程，造成测试时图谱上表现出的信号跳跃。光源切换时，从可见到紫外，因光源强度的差异，造成信号波动。检测器切换时，从近红外到可见，因检测器信号水平的差异，造成信号波动。这样的波动对于强吸收和弱吸收样品的影响尤为明显。具体波动的波长位置因仪器设置不同而略有差异，实际的波动情况也和样品相关。

 

常见问题四：数据平滑问题

 

紫外测试中，一般测试紫外-可见区默认间隔1nm，测试近红外-中红外区，步长间隔会适当大些，可以2-4nm，特殊需求会另外调整。上述情况下，数据仍可能存在曲线毛糙、不光滑的情况，为了使曲线更美观，可将曲线适当做平滑处理。但平滑处理必须合理适度，过度平滑后的曲线可能失真，偏离实际情况。一般测试时都默认保存原始数据而不做任何数据上的处理，确有需要平滑处理再另用origin处理。

 

常见问题五：吸光度相关问题

 

吸光度为负值，有多种可能的情况：

 

测试问题：是否合理操作，舱门是否关到位；基线校正或空白扣除未做好；空白对照与样品的位置放反；参比样的选择、比色皿的规范使用；

 

样品原因：因为测的是相对数值，做参比的假想是：参比的吸收是零，实际上存在一些弱吸收样品的吸收比参比样还小的情况。比如我们固体样测试时，选择的参比大多是硫酸钡（R%≥99.8%），大部分物质反射率低于硫酸钡，也存在个别物质反射率在特定波段大于硫酸钡的情况，就会出现负值。另外，也可能是样品中负干扰的物质，有荧光或磷光的影响。

 

常见问题六：执着要计算吸收率

 

首先要先区分清楚吸光度和吸收系数、吸收率的概念。

 

吸收率其实是个不太严谨的概念，可理解为1-R%-T%的结果。但是实际应用中，吸收率的换算并不准确。因为无论是R%还是T%，本身测的都是相对的数值，且透过的测试和反射的测试，光打在样品的区域未必是一致的，导致1- R%-T%结果的误差，甚至出现负值。一般测试中，我们也不建议去算吸收率。严格意义讲，吸收率主要体现在特殊的薄膜材料，均质的，光学玻璃等。

 

常见问题七：与预期不符

 

经常遇到如下的测试反馈：

 

xxx nm处的峰型很奇怪，不应该出现；xxx nm处的特征吸收峰没有出现；预期样品对整个可见光区的吸光度很强（或反射率很高），但实际结果有规律不一致；预期两个样品吸光度（或反射率）有差异，但实际结果差别不大等等等。

 

一般来说，对于常规的样品，只要仪器良好、操作得当，测试结果一般不会有较大偏差。当然对于特殊的样品，如上说的强吸收和弱吸收的样品、或者样品本身不均匀，都可能导致仪器响应的一些误差和不同仪器测试的结果差异。关于测试结果与预期不符的情况，还是要结合样品情况再多做分析或复测排查。

 

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