MALDI-TOF MS技术在曲霉精准鉴定中的临床应用突破

曲霉鉴定技术发展现状

曲霉属真菌作为环境常见致病菌，可引发过敏综合征、慢性感染及侵袭性疾病，尤其威胁免疫缺陷人群。传统鉴定依赖菌落形态观察（图1）和显微特征分析，但难以区分近缘隐种（如抗药性显著的A.calidoustus）。分子测序虽能精准鉴别，但存在耗时久、成本高的应用瓶颈。

图1 一株黄曲霉菌株在SCA(五标记板)上孵育48小时后的外观。

质谱技术革新真菌鉴定

本研究采用MALDI-TOF MS技术对190株测序菌株进行验证，建立包含53株新增菌株的内部数据库。实验流程包含三大关键步骤：

1.标准化培养：SCA培养基30℃恒温培养48小时

2.智能采样：无菌棉签采集菌落外围新生菌丝

3.高效处理：蒸馏水乳化后直接进行质谱检测

数据库构建技术参数

临床验证结果分析

实验数据显示：

• 传统形态学鉴定准确率81%（种水平）
• 基因测序鉴别出20个菌种（含14个隐种）
• MALDI-TOF MS与测序结果一致性达92%

突破性发现：β-微管蛋白联合钙调蛋白基因分析，成功鉴别出具有临床意义的耐唑类菌株，为精准用药提供关键依据。

技术应用前景

本研究成果证明：

1.质谱技术显著缩短检测周期（48小时→4小时）

2.检测成本降低约65%（相比分子测序）

3.数据库覆盖率达临床常见曲霉的93%

建议医疗机构建立区域性真菌质谱数据库，定期更新隐种蛋白图谱，提升侵袭性真菌病的早期诊断能力。

参考文献：

1.&nbspSamson, R. A.;  Visagie, C. M.;  Houbraken, J.;  Hong, S. B.;  Hubka, V.;  Klaassen, C. H.;  Perrone, G.;  Seifert, K. A.;  Susca, A.;  Tanney, J. B.;  Varga, J.;  Kocsubé, S.;  Szigeti, G.;  Yaguchi, T.; Frisvad, J. C., Phylogeny, identification and nomenclature of the genus Aspergillus. Stud Mycol 2014, 78, 141-73.

2.&nbspVidal-Acuña, M. R.;  Ruiz-Pérez de Pipaón, M.;  Torres-Sánchez, M. J.; Aznar, J., Identification of clinical isolates of Aspergillus, including cryptic species, by matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Med. Mycol. 2018, 56 (7), 838-846.

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