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生物透射电子显微镜（TEM）
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部分论文致谢
项目简介
生物透射电镜是观察和研究超微结构的重要工具，可用于观察细胞整体结构、亚细胞结构。生物细胞样品内部形态观察建议用专门应用于生物样品观察的透射电镜，其电压在80-120kv可以降低生物样品因高能电子束辐射而损伤的影响，同时依赖于生物样品制备技术的发展，如超薄切片技术、负染色技术、冷冻制样技术、细胞化学技术等，广泛应用于组织学、细胞学、病毒学、病理学及材料学等多个学科的研究中，如常用来观察细胞整体结构、细胞膜细胞壁细胞器的变化、材料进入细胞内部的分布情况、细胞应付外界刺激产生的自噬小体，以及外界生物入侵的侵染结构等等。
服务流程
倒掉固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；用1%的锇酸溶液固定样品1-2h；小心取出锇酸废液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；用梯度浓度（包括30%，50%，70%，80%，90%和95%五种浓度）的乙醇溶液对样品进行脱水处理，每种浓度处理15min，再用100%的乙醇处理20min；最后过度到纯丙酮处理20min。用包埋剂与丙酮的混合液（V/V=1/1）处理样品1h；用包埋剂与丙酮的混合液（V/V=3/1）处理样品3h；纯包埋剂处理样品过夜；将经过渗透处理的样品包埋起来，70℃加热过夜，即得到包埋好的样品。样品在超薄切片机中切片，获得70-90nm的切片，切片经柠檬酸铅溶液和醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液各染色5-10min，晾干后即可在透射电镜中观察。
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结果展示
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样品要求
送样要求：
1.样品状态：所有样品必须经过规范的化学固定处理，并已在4℃下稳定保存。
2.样品量：离心收集的沉淀体积应不少于一粒绿豆大小，组织修切成≤1 mm³的小块。
3.取材时限：全程≤3-5分钟。
4.固定液：使用符合电镜标准的2.5%戊二醛固定液。
5.包装：样品管必须密封良好，固定液无泄漏风险，并明确标识。
6.寄送：若环境温度高，可将离心管用泡沫包好后，在泡沫盒中放1-2个冰袋，样品务必冰袋隔开，避免低温冰冻造成样品结冰。冬天气温低，不需要冰袋寄送，但部分地区要做好保温措施，防止外界环境温度造成结冰。
服务周期：
样品接收后的3周左右，如遇法定假期需要顺延，具体实验周期及送样时间请与科学指南针工作人员沟通确认，谢谢！
交付内容：
每样提供10张拍摄图片（不含分析服务），如需照片数量超过10张，按照40元/张收费。
结果反馈请在测试完成一周内，不建议回收样品，如有需要请提前反馈给指南针工作人员。
常见问题
1. 2.5%戊二醛固定液如何配置？
市售25%戊二醛水溶液 10ml
0.2M磷酸盐缓冲液（pH7.0） 50ml
蒸馏水加至 100ml
2. 0.2M，pH7.0磷酸缓冲液的配置方法？
A液：Na2HPO4·H2O 31.61g，或者Na2HPO4·7H2O 53.63g，或者Na2HPO4·12H2O 71.64g，加蒸馏水至1000ml
B液：NaH2PO4·H2O 27.6g，或者NaH2PO4·2H2O 31.21g，加蒸馏水至1000ml
0.2M，pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml（合起来是100ml）
