生物冷冻扫描电子显微镜(Cryo-SEM)
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项目简介
冷冻扫描电镜(Cryo-SEM)是基于超低温冷冻制样寄传输技术,可以直接观察液体、半液体样品;生物样品常规制样方法中干燥过程可能对含水量较高的样品产生影响,而冷冻技术能避免细胞变形,具有制样简单快速的优点;另外与同样可以观察含水样品的环境扫描电镜相比,冷冻扫描可在高真空状态下观察,提高了分辨率,并且可以对样品进行断裂,但成本和技术要求相对较高。
技术服务路线
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结果展示
图1.真菌散囊孢子
图2.真菌菌丝 图3.霉菌孢子头
样品要求
送样方式:
粉末:50-100mg;
液体:最少 100 微升,为了保证有足够的备用量,可多提供一些,乳液为避免破乳需要装满1.5ml离心管;
薄膜:面积需要大于3 mm*3 mm,极软样品建议平铺在可机械断裂基底上;
块状固体-做表面:小于3 mm (长)*2 mm (宽)*2 mm (高),(硬的材料需要切割好暴露出拍摄面),如有特殊要求请提前联系工作人员确认;
块状固体-做断面:长宽小于3 mm (长)*2 mm (宽)、高度做到3-4 mm,常规材料机器冷刀断裂;硬的材料如需切割断面请提前咨询工作人员确认;
生物类样品:微生物类需要收集绿豆粒大小沉淀后固定后寄送;生物组织类的样品建议固定后寄出,具体送样要求请详细咨询对接经理
寄送要求:
①可以提供新鲜样品低温寄送,如果担心寄送过程样品变化,可以用2.5%戊二醛固定后寄送。
②根据样品的保存条件,常温保存可直接寄送;
③4℃保存可以加2-3个冰袋寄送,冰袋一定不要直接接触样品管,用泡沫包裹样品,避免样品结冰,注意冰袋融化不要弄湿预约单;
④如果是-20度保存样品需要干冰寄送,干冰消耗量以每天7kg/d计算,保证足够量的干冰;
⑤样品管上编号需要按照送样单上的编号,尽量简化编号。
服务周期:
一般为样品接收后的1-2周左右,如遇法定假期需要顺延,具体实验周期及送样时间请与科学指南针工作人员沟通确认,谢谢!
交付内容:
每样提供8张拍摄图片(不提供分析服务。默认手机或者电脑云视频拍摄,每个样本拍摄时长在30min以内,超出时间500/30min收费;如果拍摄进行中发现样本不符合预期,拍摄时长在10min以内且仅拍了2张以内的照片,可以及时叫停,收费为400/样),如需照片数量超过将产生额外费用;
结果反馈请在测试完成一周内,不建议回收样品,如有需要请提前反馈给指南针工作人员。
常见问题
1. 冷冻扫描样品具体处理流程?
- 在样品台上涂抹导电炭胶,用镊子夹起样品粘在导电炭胶上。
- 液氮雪泥速冻:将粘有样品的样品台投入液氮雪泥中速冻30s后,使用低温冷冻制备传输系统在真空状态下将其转移至样品制备腔室进行升华镀金处理。
- 升华和镀金:样品在- 90℃升华10min之后以10 mA的电流溅射镀金60 s,送入扫描电镜样品室观察,冷台温度-140 ℃,加速电压 5 kv。