【摘要】 化学衍生试剂得选择首先应根据待测物得结构与化学性质找出可能适合得衍生化反应及相应得分离和检测方法。

用于高效液相色谱分析的化学衍生化反应的化学衍生试剂有着如下要求:

(1)反应可以迅速定量的进行,对反应条件要求不苛刻;

(2)反应的选择性高,最好只与待分析组分发生反应;

(3)过量的衍生化试剂或反应的副产物不干扰样品的分离与检测;

(4)衍生化试剂方便易得。

 

化学衍生试剂得选择首先应根据待测物得结构与化学性质找出可能适合得衍生化反应及相应得分离和检测方法。其次还要考虑样品基质和可能存在得干扰物质的影响。常见的衍生试剂包括可见-紫外、荧光和电化学衍生化试剂以及手性衍生化试剂。

 

多数的药物和生物医学物质并没有明显的可见-紫外吸收,为了使用可见-紫外检测器,需将强发光基团引入。

 

HPLC得荧光检测器要比紫外检测器灵敏度要高得多,适用于痕量分析。现实是,多数药物及生命重要物质如氨基酸、生物胺、脂肪酸等本身都不具有荧光,因此需与荧光衍生化试剂反应接枝荧光基团进行荧光检测。

 

电化学衍生化试剂是利用样品组分与衍生化试剂反应,生成具有电化学活性的衍生物,以便对电化学检测有灵敏的相应。

 

多数的衍生化试剂都是高度共轭的芳香化合物。其中包括胺类和氨基酸得可见-紫外衍生化试剂、羧酸的可见-紫外衍生化试剂、羟基化合物得可见-紫外衍生化试剂、羰基化合物得可见-紫外衍生化试剂。在电化学衍生化试剂中,氧化电化学检测法是优先考虑的方法,因此具有或能生成前两类基团的衍生化试剂更为常用。

 

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