【摘要】 氨基酸是蛋白质构成的基本单元，由于其参与机体正常代谢和许多生理机能而受到重视。

氨基酸是蛋白质构成的基本单元，由于其参与机体正常代谢和许多生理机能而受到重视。蛋白质、多肽、氨基酸类药物在临床上亦有广泛应用。HPLC是氨基酸分析的重要手段，80年代以来在肽类、蛋白质的分析方面也得到了广泛的应用。

由于氨基酸结构及性质既有相似性又有其各自特点，其混合物的分离测定有较大难度，HPLC法在这一方面显示了其特有的优越性，但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射，为提高分析的检测灵敏度通常将氨基酸衍生化，衍生化方式有柱前衍生化和柱后衍生化.1958年，Spackman等首先介绍了用离子交换色谱与柱后茆三酮衍生化的方法分析氨基酸，从而建立起了传统的氨基酸自动分析技术。其后，传统氨基酸自动分析技术随着新的衍生化试剂的应用、HPLC技术的迅速发展，而在分析速度、灵敏度和自动化程度上大为提高。但柱后衍生化所需色谱仪器较复杂，需要额外的泵和反应器以保证洗脱液与柱后试剂均匀混合﹔常用衍生化试剂茆三酮、邻苯二甲醛(OPA)均有一些不足之处。

传统的柱后衍生化法用离子交换色谱分离氨基酸,色谱柱常采用阳离子交换树脂柱。用三种不同酸度缓冲液，pH3~4 (多为pH3.25)、pH4~5 (多为pH4. 25). pH5~6 (多为pH5. 28),顺序洗脱，并用氢氧化钠液再生色谱柱。柱后采用一泵或多泵输入反应液，与经色谱柱分离的氨基酸进行衍生化反应，并经检测器检测。此法须专门仪器且对仪器要求较高。近40年来经研究改进，已使反应时间大为缩短，灵敏度也有很大提高，并且引进了多种新的衍生化试剂。也可采用液相色谱仪于柱后加衍生化装置。

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