【摘要】 反相离子对高效液相色谱法

(1）反相离子对高效液相色谱法。这是生物胺和拟肾上腺素药物及其代谢产物的分离中应用最广的方法。在一般反相色谱的适用pH范围内(pH2~8)，许多儿茶酚胺仍以阳离子的形式存在，难于被保留在反相柱上，与离子对试剂形成离子对后可以延长保留时间，改善分离效果。常用的离子对试剂是烷基磺酸钠"~和烷基硫酸钠”,也有樟脑磺酸和多氟羧酸的报道。而且改变离子对试剂的烷基链长度或试剂浓度均能影响保留时间。

 

(2) 反相高效液相色谱法。反相高效液相色谱法能分离5-羟色胺(5-HT)和儿荼酚胺的代谢物3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、5-羟基蚓噪乙酸(5-HIAA)和3-甲氧基-4-羟基苯乙酸（高香草酸，HVA)等，常用固定相为ODS，流动相是醋酸盐缓冲液和甲醇的混合溶液。但是肾上腺素、去甲肾上腺素等儿茶酚胺及其酸性代谢产物都是极性化合物，在反相柱上的保留时间较短，易受生物样品中极性杂质的干扰。降低流动相的 pH，能延长酸性代谢产物的保留时间。用硼酸盐缓冲液（碱性）作流动相能分离儿茶酚胺。柱前荧光衍生化后儿茶酚胺的极性大为降低，更适合于反相色谱分离。

 

(3) 离子交换色谱法。阳离子交换色谱法很早就已用于儿茶酚胺及其带氨基的代谢产物的分离，但是不能同时分离酸性和中性代谢产物。酸性代谢产物可以用阴离子交换色谱法分离。这些方法都已逐渐被RP-HPLC和离子对RP-HPLC取代。

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.

 

科学指南针通过互联网技术建立更可靠的服务标准，全国26个办事处，12个城市拥有自营实验室，最好的设备、最专业的老师为您服务。