间羟胺色谱检测

荧光衍生化 RP-HPLC测定尿样中多巴酚丁胺和其它儿茶酚胺

(1)色谐条件﹑色谱柱:Spherisorb ODS2柱(10cm×4. 6mm，3pm)或MicroSpher C,柱( 10cm × 4.6mm，3pm)。流动相:A. 0. 05mol/L醋酸钠(pH7.0)-乙腈-乙醇(60 : 20 : 20);B. 0. 05mol/L醋酸钠(pH7.0)-乙腈-乙醇(30 : 60 : 10)。阶式梯度:0～6min，48%B;6~6. 1min，48%~100%B; 6.1~ 16min，100%B。流速:1.0ml/min。检测:荧光，350nm/ 480nm。

(2)方法准确度和精密度平均提取回收率:多巴酚胺，94.0%(n=8)﹔其它儿茶酚胺:93%~98%。日内RSD:NE，0.6%~3.0%;E，1.3%~6.1%;DA，1.2%~8.4%﹔多巴酚丁胺，2.2%~8.4%。日间RSD:NE，2.1%~7.0%;E，1.5%~7.8%;DA，1.3%～9.9%%:多巴酚丁胺,2.4%～4.9%。

(3）线性范围和检测限﹑线性范围上限:多巴酚丁胺，9.4ug/ml 尿样，相当于33ng进样量。

间羟胺(Metaraminol)主要为α受体激动剂，升压效果比去甲肾上腺素稍弱，但较持久。常用其酒石酸氢盐，易溶于水、乙醇，遇碱性药物易分解。美国药典用离子对RP-HPLC测定间羟胺注射液的含量，ODS柱，甲醇-0.0032mol/L的己烷磺酸钠为流动相(用H,PO。调节至pH3.0)，紫外检测波长为264nm，下面是一类似的离子对RP-HPLC方法。

离子对RP-HPLC测定片剂中的间羟胺和其它拟肾上腺素药

(1)色谱条件色谐柱:WhatmanPartisil 5 oDS-3柱（25cm × 4.6mm,5pm)。流动相:0.2%冰醋酸（含有0. 01mol/L辛烷磺酸钠〉-甲醉(70 : 30),流速:1.0ml/min。检测:紫外，220nm。

(2)样品测定取不少于20片的药片，称重并研碎后，精密称取适量溶于0. 01mol/L HCl,必要时滤过。取滤液20pul进样。色谱图见图11-7。保留时间:在24min内的出峰顺序是NE、E、异丙肾上腺素、去氧肾上腺素和间羟胺。

(3)方法准确度和精密度回收率:NE，100.2%;E，99.1%~100.8%﹔异丙肾上腺素，99.2%~99.6%;去氧肾上腺素，99.4%﹔间羟胺，98.8%。RSD:NE,0.65%，E，1.40%﹔异丙肾上腺素，0.81%﹔去氧肾上腺素，0.93%﹔间羟胺，0.62%。

(4）线性范围和检测限线性范围;所有各组分，0.2~-10pg.

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

【4】李发美. 医药高效液相色谱技术[M]. 人民卫生出版社, 2000.

【5】严拯宇. 中药薄层色谱分析技术与应用[J]. 中国医药科技出版社, 2009.