【摘要】 苯丁酸氮芥(Chlorambucil)为芳香族氮芥类烷化剂。

苯丁酸氮芥(Chlorambucil)为芳香族氮芥类烷化剂。难溶于水,溶于乙醇、氯仿、丙酮等有机溶剂。其无水乙醇溶液在257士1nm处有最大吸收,代谢产物苯丁酸氮芥N-氧化物在240nm处有最大吸收。苯丁酸氮芥N-氧化物在甲醇中最稳定,贮存两周未见分解,在pH7.5~7.7的 Tris 和碳酸钠缓冲液中也较稳定,但在碱性介质中立即分解。而苯丁酸氮芥在甲醇中仅稳定两天,在中性和碱性溶液中迅速水解为单和二羟基苯丁酸氮芥。

血浆样品常用甲醇、乙腈-二氦甲烷-己烷等萃取﹐蒸干溶剂,残渣用流动相溶解进样。也可以先用浓高氯酸沉淀血浆中大分子物质,再用Sep-Pak Cs固相萃取小柱分离样品,用甲醇洗脱药物。反相色谱法和反相离子对色谱法常常用来分离苯丁酸氮芥和代谢产物以及结构类似物质,如使用氢氧化四丁基铵作离子对试剂,分离测定苯丁酸氮芥及其6种结构类似物质。检测方法常用紫外和电化学检测。

l.RP-HPLC测定小鼠肝微粒体中苯丁酸氮芥和苯丁酸氮芥-N-氧化物

(1)色谱条件惇色谱柱:Nova Pak Cg柱(15cm× 2mm,4pm)。流动相:0.05%三氟醋酸(pH2.25)-甲醇(48∶52)。流速:0. 35ml/min。检测:紫外,258nm,进样15min后,改为249nm。

(2)样品测定取苯丁酸氮芥和苯丁酸氮芥N-氧化物加入至小鼠肝微粒体Tris 混悬液(pH7.5,37℃)中,加入2倍体积的甲乙酮,涡旋混合45s,离心5min,取上清液真空干燥,残渣溶于甲醇1ml 中,用0.2pm 聚酰胺滤膜滤过,进样。保留时间:内标物[3-(4-羟苯基)]丙酸,约8min;苯丁酸氮芥,约 30min;苯丁酸氮芥-N-氧化物,约35min。

(3)方法准确度和精密度提取回收率:苯丁酸氮芥,99.1%﹔苯丁酸氮芥N-氧化物,97.3%。

(4)线性范围和检测限线性范围:二者均为40~2000ng。

(5)说明聚酰胺滤膜滤过对三种组分的浓度均无影响。苯丁酸氮芥和苯丁酸氮芥N-氧化物的甲醇和乙醇溶液放置两周仍稳定(室温和一20℃).

 

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