【摘要】 对于复杂样品中某些感兴趣的蛋白质的定量，蛋白质印迹分析是最广泛使用的方法。

对于复杂样品中某些感兴趣的蛋白质的定量，蛋白质印迹分析是最广泛使用的方法。它能够基于特定抗体的使用检测目标蛋白质。然而，整个过程通常非常耗时。然而，随着快速印迹系统的发展和免疫染色方法的进一步发展，可以实现处理时间的减少。通过蛋白质印迹进行可靠蛋白质定量的主要挑战是足够的数据标准化和稳定的蛋白质检测。通常，目标蛋白信号的标准化是基于管家蛋白（例如，甘油醛 3-磷酸脱氢酶、β-肌动蛋白）进行的，并假设这些蛋白在整个实验中以相同水平组成型表达。然而，几项研究已经表明，情况并非总是如此，使这种方法不是最理想的。另一种策略使用总蛋白归一化，其中目标蛋白的丰度与每个泳道中的总蛋白量相关。这种方法独立于单个加载控制，并且提高了量化精度和可靠性。对于蛋白质印迹，有几种检测方法可用，例如比色、化学发光、放射性、荧光检测。传统的比色染色往往具有灵敏度低、动态范围有限和重现性低的问题。基于化学发光的方法很简单，但检测到的信号与蛋白质丰度（蛋白质含量 >5μg）没有线性相关，并且具有相对较窄的动态范围。放射性对健康有害。为了克服这些限制，开发了无染色方法，允许结合荧光标准和基于无染色荧光的凝胶中和转移到膜后的总蛋白可视化。在这里，我们提出了一种快速蛋白质印迹实验方案，它结合了使用 iBlot 系统的快速印迹和使用 ReadyTector® 多合一解决方案和智能蛋白质层 (SPL) 方法的快速免疫染色。