【摘要】 对于透射电子显微镜，负染色原理也适用于这种情况。

负染原理由来已久，它常被用于明场光学显微镜中，用来显示浸泡在黑色或深色染料溶液中的细小散布的颗粒物质，如细菌、孢子、原生动物、寄生虫和卵囊，此时，显微镜图像在染色后的暗色或有色的周围背景中表现为浅色。对于透射电子显微镜，负染色原理也适用于这种情况。虽然在学术报道中可以发现异常的电子显微镜阴性染色的例子，但布伦纳和罗伯特·W·霍恩在1959年建立了使用烟草花叶病毒和芜菁黄花叶病毒进行病毒阴性染色的工作程序，这项技术随后被迅速用于许多其他植物、动物和细菌病毒的研究。磷钨酸被用作细胞和病毒材料的阴性染色已经有一段时间了，发现如果涂布在碳支撑膜上的样品清洗不当，颗粒周围的残留污渍可能会产生相反的对比图像。一旦认识到这一点，使用中性pH磷钨酸盐溶液的意图即是在生物材料周围留下一层薄薄的含水污渍，并使其渗透到任何含水通道的样本中。这样风干后，病毒和其他颗粒样本基本上嵌入了一层薄薄的无定形污渍。

 

醋酸铀酰也被用作阴性染料，其次是硅钨酸钠、钼酸铵、钨酸甲胺和钒酸甲胺。低对比度负染也使用低原子量的金属盐，他们的共同特征是干燥的负染盐的薄层都应该是无定形的。在最初的工作中，病毒样本通常与负染色液混合，并作为液滴喷洒到碳支撑膜上，瓦伦丁成功地将这一方法应用于蛋白质分子。

 

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