【摘要】 多色流式细胞术可以同时检测细胞凋亡和表面抗原的表达。

细胞凋亡过程中，质膜和大部分细胞器在较长时间内保持形态和功能的完整。然而，坏死是损伤(补体攻击、高热、溶性病毒感染和接触毒素)的结果，其特征是线粒体肿胀和质膜完整性的迅速丧失。多色流式细胞术可以同时检测细胞凋亡和表面抗原的表达。细胞凋亡是用原位测定法测定的，该原位测定法利用酶末端脱氧核糖核苷基转移酶的能力，催化生物素化核苷酸添加到DNA内核溶解裂解过程中产生的游离3 ' -OH基团上。用荧光染料偶联链亲和素定量生物素化核苷酸的掺入。免疫荧光法采用三色流式细胞术鉴定凋亡细胞的表型。多色流式细胞术检测细胞凋亡和免疫荧光提供了几个优点。(1)可区分凋亡细胞和坏死细胞。(2)细胞凋亡的表型可以在异质系统中确定。Dolzhanskiy等人[1]证明了，与其他外周血单核细胞相比，T细胞对cam诱导的细胞凋亡具有相对抗性，双阴性和单阳性胸腺细胞都对类固醇诱导的细胞凋亡具有抗性。(3)流式细胞术TdT法检测细胞凋亡相关DNA降解方法与凝胶电泳相比具有极高的敏感性。只要2-5 × 103英寸的细胞就能发出足够的信号，即使只有一小部分细胞发生凋亡，也可以检测到DNA链断裂。这种方法的灵敏度和特异性都不能与任何检测细胞凋亡的电泳方法相匹配。多色流式细胞术检测在研究细胞对化疗的反应方面具有一定的临床应用价值。一些抗癌药物可诱导易感细胞凋亡。

[1] Dolzhanskiy A , Basch R S .Flow cytometric determination of apoptosis in heterogenous cell populations[J].Journal of Immunological Methods, 1995, 180(1):131-140.DOI:10.1016/0022-1759(94)00309-K.

 

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