【摘要】 在这里，我们让人类ASCs在自我更新和成脂分化条件下接受siRNA介导的Notch3敲除。

脂肪来源的基质/干细胞(ASCs)是多能成体干细胞，能够自我更新并能够分化成有限数量的中胚层谱系细胞。ASCs的分泌模式、免疫调节、自我更新、多能性和归巢特性使其成为再生医学、器官修复和基于细胞的治疗的有用工具。脂肪干细胞来源于个体的脂肪抽吸物，在临床上是有吸引力的工具，因为它们容易获得，并且在其免疫调节和再生能力方面具有治疗潜力。

 

为了使ASC有资格用于患者，它们必须(a)可扩展离体具有高增殖潜能；(b)拥有多种能力；和(c)必须易于收获用于自体移植。人类脂肪来源的基质/干细胞(hASCs)具有巨大的治疗潜力，并能够提供对人类发展和疾病的洞察力。

 

在这里，我们让人类ASCs在自我更新和成脂分化条件下接受siRNA介导的Notch3敲除。分别通过染色和alamarBlue分析评估生存力和增殖率来监测自我更新。脂肪形成通过油红O染色测定，蛋白质印迹，和定量实时RT-PCR来确定多潜能性和脂肪生成标记。

 

通过qRT-PCR证实，Notch3在自我更新的hASCs中表达，但敲除。蛋白质印迹，显示对没有影响细胞活力，通过活-死染色测量，或细胞增殖比率，通过alamarBlue测定法测量。虽然Notch3只是hASCs表面表达的四种Notch受体之一，但这种受体似乎对成脂分化的适当调节很重要，可能作为负调节因子阻止不适当的成脂或促进ASC的其他谱系定向[1]。

 

先前的研究显示了Notch信号在脂肪形成中的作用，包括Notch1在代谢调节和棕色脂肪组织生成中的鉴定。通过将第二个Notch受体与脂肪生成的调节联系起来，已经确定了治疗肥胖症的另一个潜在靶点。具体来说，Notch3活性的错误调节可能导致ASCs向脂肪细胞的加速转化，为不可控性提供了一个潜在的解释。

 

[1] Demi A Sandel, Mengcheng Liu, Ngozi Ogbonnaya, Jamie J Newman. Notch3 is involved in adipogenesis of human adipose-derived stromal/stem cells[J]. Biochimie. 2018, 150: 31-36.

 

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