【摘要】 研究结果表明,质谱作为一种可靠的高通量工具,可用于人类尿液样本中微生物病原体的鉴定,具有巨大的潜力。

尿路感染是一般人群和医院患者中最常见的细菌感染形式,占所有感染的近25%,在女性中比在男性中更常见。据估计,40%-50%的女性一生中会发生UTI,约33%的女性会复发性急性单纯性UTI[1]

 

常见的原发性细菌性泌尿病原体是大肠埃希菌、腐生葡萄球菌、肠球菌属、奇异变形杆菌和肺炎克雷伯菌。最常见的继发性泌尿系病原体是金黄色葡萄球菌、催产克雷伯菌、铜绿假单胞菌、无乳链球菌和真菌病原体念珠菌。大约60-80%的无并发症细菌性尿路感染是由大肠杆菌引起的。

 

研究人员已经认识到尿液不是无菌的,并证实了下尿路中常驻细菌菌群(尿微生物群)的重要性。常驻尿微生物群主要由加氏乳杆菌、大肠棒状杆菌、沙利放线杆菌、尿气球菌、阴道加德纳菌、心绞痛链球菌、表皮链球菌、中放线菌和双歧杆菌属组成[2]

 

在人类尿液样本中可靠的高通量微生物病原体鉴定对于有膀胱炎症状的患者至关重要。Oros D的研究[3]评估了质谱法从天然尿液样本中鉴定尿路病原体的潜力,总共从临床门诊患者中收集了 16 份超过 105 CFU/mL 的尿液样本。使用标准尿液培养方法分析这些样品,然后使用 16S rRNA 基因测序作为对照,描述了正在测试的不依赖培养的 MALDI-TOF/TOF MS 方法,介绍了自下而上蛋白质组学的优点和缺点,使用 MALDI-TOF/TOF 串联质谱法,用于不依赖培养的尿路病原体鉴定(例如直接来自尿液样本),直接方法提供了对单细菌样品中属水平细菌的可靠鉴定。

 

通过蛋白质组学获得的分类学鉴定结果与临床使用的标准尿培养测试和基于 16S rRNA 测序的基因组测试进行了比较。研究结果表明,质谱作为一种可靠的高通量工具,可用于人类尿液样本中微生物病原体的鉴定,具有巨大的潜力。

 

在这种情况下,MALDI-TOF/TOF 被用作尿液样品中细菌测定的分析工具,所获得的结果强调了影响 MS2 数据分析可靠性的储存条件和样品制备方法的重要性。所提出的方法足够简单,可以在现有的临床环境中使用,并且非常适合可疑的单一生物感染病因。需要进一步研究以确定多种微生物尿液样本中的病原体。

 

1.Dason S, Dason JT, Kapoor A. Guidelines for the diagnosis and management of recurrent urinary tract infection in women. J Can Urol Assoc. 2011;5(5):316–22.

2.Hilt EE, McKinley K, Pearce MM, Rosenfeld AB, Zilliox MJ, Mueller ER, et al. Urine is not sterile: use of enhanced urine culture techniques to detect resident bacterial flora in the adult female bladder. J Clin Microbiol. 2014;52(3):871–6.

3.Oros D , Ceprnja M , Zucko J ,et al.Identification of pathogens from native urine samples by MALDI-TOF/TOF tandem mass spectrometry[J].Clinical Proteomics, 2020, 17(1).

 

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