【摘要】 首次将NPLC与反相超高效液相色谱联用，实现了对中等极性天然产物的在线综合分析。

Jia-Fu Li等[1]采用热蒸发辅助吸附（TEAA）界面，建立了二维正相液相色谱-反相液相色谱（2D NPLC RPLC）分析系统。该新型TEAA接口的加热温度高于溶剂沸点，允许快速去除有机NPLC溶剂，并成功地解决了NPLC和RPLC之间的溶剂不相容性问题。

 

该系统在190 s的调制时间内实现了两个维度之间的快速在线溶剂交换，并应用于蟾蜍皮肤提取物的分析。首次将NPLC与反相超高效液相色谱联用，实现了对中等极性天然产物的在线综合分析。

 

值得强调的是，与2D RPLC RPLC相比，2D NPLC RPLC系统提供了优异的分辨率和正交性（75.2%）。值得强调的是，NPLC和RPLC的不同分离机理显著提高了分离选择性。根据R.报道的方法，对RPLC RPLC和新NPLC RPLC系统之间的分离空间（峰分布）进行比较，以评价选择性。

 

由于两个维度上的分离机制相似，RPLC RPLC的分离是四边形模式，而NPLC和RPLC的组合是五边形模式分离。用计算的峰分布面积Aeff确定两个维度的正交性（O 0）。结果表明，NPLC-RPLC系统的正交性（75.2%）明显优于RPLC-RPLC系统（38.0%）。

 

建立了一种新的在线NPLC-RPLC系统，并成功地应用于蟾蜍皮粗提液的二维分析。该界面利用NP溶剂在高温下快速蒸发的特点，实现了从一维到二维的在线溶剂交换，彻底解决了移动的相不相容的问题。

 

当与我们以前报道的VEAA接口相比，新的TEAA方法使系统可靠。值得强调的是，首次实现了基于NP溶剂去除界面的全面NPLC-RPLC分析中等极性天然产物。

 

由于NPLC和RPLC的天然正交性，该体系具有较高的分离分辨率和选择性，为复杂样品提供了一种有效的分析方法。结果表明，该系统具有TEAA界面，操作简便，分离效率高，可用于复杂天然产物的常规分析。

 

[1]Fang,Mei-Juan,Yun-Long,et al.Comprehensive two-dimensional normal-phase liquid chromatography x reversed-phase liquid chromatography for analysis of toad skin[J].Analytica chimica acta, 2017, 962:114-120.

 

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