组织固定包埋步骤

一、标本固定

取下标本后放于10%中性福尔马林液玻璃瓶中固定，但要注意对于大块标本最好采用取材后先固定48小时，然后将大标本分切成小块再次固定，固定时间为1-2周，以使组织得到充分固定。固定完成后，将标本流水冲洗24小时去除组织中福尔马林液。

二、脱水

脱水溶液脱水时间

70%酒精24小时

80%酒精 24小时

90%酒精 24小时

95%酒精(1) 30小时

95%酒精(2) 30小时

100%酒精 (1) 24小时

100%酒精 (2) 24小时

100%酒精+100%乙醚(V:V=l:l)24小时

氯仿溶液 (1) 24小时

氯仿溶液 (2) 24小时

氯仿溶液 (3) 24小时

三、浸润

组织经脱水透明后分别浸入浸液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中，于4℃冰箱中每液浸润7天，每天抽真空2小时，以使浸润液更好地渗入到组织深部。

三种浸液配制方法:

浸润液I(原液):甲基丙烯酸甲酯95ml与邻苯二甲酸二丁酯5ml混合，磁力搅拌器搅拌2小时。

浸润液II:每100ml原液加入过氧化苯甲酰1.5g，磁力搅拌器搅拌4小时。

浸润液III:每100ml原液加入过氧化苯甲酰4g，磁力搅拌器搅拌4小时。

四、包埋

三浸完成后，取新配制的浸润液III倒入玻璃小瓶(注意包埋方向，瓶子大小直径在1~3.5cm)中，放入标本，加盖后室温过夜，次日放入32℃水浴箱中聚合，水浴温度从32℃→38℃→42℃→50℃分阶段提升温度，直至样品完全硬化。从水浴箱中取出小瓶，放入4℃冰箱中冷却10分钟，取出后砸碎瓶子，将组织块取出。

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