【摘要】 流式细胞仪的工作原理主要包括参数测量原理和样品分选原理。

流式细胞仪的工作原理主要包括参数测量原理和样品分选原理。

参数测量原理,流式细胞仪可以分析来自特异性荧光信号及非荧光散射信号,在照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点,进行多参数的测量。对于任何未遭受损坏的细胞,他们都能对光线进行特征性的散射,细胞对光线的反射、折射等光学特性,能够反映生物学参数,因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。当液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射的样品细胞会向整个空间散射光线,通过分析散射光的强度及其空间分布,就可以知道细胞的大小、形态、质膜和细胞的内部结构。

样品分选原理,流式细胞仪的分选功能是通过细胞分选器来实现的。喷嘴射出的液柱被流动室上的压电晶体发生的振动分割,液流均匀断裂形成一连串的小水滴,再根据选定的参数由逻辑电路判明是否将被分选,例如使用不同孔径的喷孔及改变液流速度,就会改变分选效果,而后由充电电路对选定细胞液滴充电,带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转,落入收集器中,含细胞液滴在静电场中的偏转是由充电电路和偏转板共同完成的。其它液体被当作废液抽吸掉,某些类型的仪器也有采用捕获管来进行分选的。精确测定延迟时间是决定分选质量的关键,仪器多采用移位寄存器数字电路来产生延迟,可根据具体要求予以适当调整。

 

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