【摘要】 固相酶联免疫吸附分析是基于固相载体上进行的抗原抗体的反应。

固相酶联免疫吸附分析方法

 

固相酶联免疫吸附分析是基于固相载体上进行的抗原抗体的反应。ELISA固相载体的形状主要有三种：试管、磁珠和微孔板。试管既能作为反应的容器，又可以放入分光光度计中比色。磁珠一般为直径0.6cm的圆球，表面经磨砂处理后吸附面积可大大增加，采用特殊的洗涤器，使圆珠在洗涤的过程中滚动淋洗，能够提升洗涤效果。最常用的载体为微孔板，专用于ELISA测定的产品也称为酶标板，国际通用的标准板形是96孔式。酶标板大部分由聚苯乙烯制成，当然也有其他很多种类的载体物质。聚苯乙烯具有很强的蛋白质吸附能力，抗体或蛋白质抗原吸附在酶标板上可以保留原来的免疫活性，并且价格低廉可重复使用。聚苯乙烯可制成各种形式，在ELISA测定过程中，它作为载体和容器，不参与化学反应。良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间和同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工艺的差别，各种产品的质量差异很大，因此，每一批号的ELISA板在使用前须事先检查其性能。

 

板式酶联免疫吸附分析方法是ELISA方法中最常用的形式，此方法常用96孔微量滴定板作为固相吸附材料，为便于少量样品的检测，有制成8联孔条或12联孔条的，放入座架后，大小与标准ELISA板相同。ELISA板的特点是可以同时进行大量样品的检测，并可在酶标仪上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于板式ELISA检测，包括加样、洗涤、保温、比色等步骤，对操作的标准化极为有利。

 

参考文献：

  • 王硕. 酶联免疫吸附分析方法[M]. 科学出版社, 2011.

 

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