【摘要】 抗原分子能够刺激机体产生抗体,而一种抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合并发生反应,这体现了抗原抗体结合具有高度特异性。

抗原分子能够刺激机体产生抗体,而一种抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合并发生反应,这体现了抗原抗体结合具有高度特异性。抗原的特异性取决于抗原决定簇的数目、性质和空间构型,而抗体的特异性则取决于抗体Ig Fab段的可变区与相应抗原决定簇的结合能力。免疫分析就是一种利用特定抗体与抗原或半抗原发生高选择性、高特异性识别和结合的分析手段,它是一种能对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。通过在某种固相载体表面使抗原或抗体结合,并保持其免疫活性。再使抗原或抗体与某种酶连接形成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量越多呈现的颜色就越深,而产物的量与样品中待检物质的量成正比,所以可以根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。

 

ELISA为分三个部分组成:免疫识别,信号输出和数据处理。免疫识别是在96孔聚苯乙烯板上将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体,然后利用抗体识别待测的抗原。接着用辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidase,HRP)、碱性磷酸酯酶、葡萄糖氧化酶等标记的抗体通过直接或者间接的方式输出识别信号。最后利用计算机检测信号强度、标准样品浓度梯度等信息,通过程序计算得出待测样中目标抗原的浓度。

 

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