衍生化技术-3

固相衍生化是将固体颗粒填充于内径5-6 mm、长度25-30mm的柱子内，这些固体颗粒连接有经过处理接枝有反应基团，叫作固相反应剂，样品在通过时与反应剂发生反应，这种衍生装置较为简单，固相反应器多用作柱后衍生，也可作为柱前衍生，特点是反应试剂局部浓度很高利于反应进行；衍生化试剂不会进入检测器，降低检测成本；反应速度取决于溶液接触面积反应速度快且受色谱流动相影响小。

固定化酶衍生化是把酶连接于螺旋管的内壁上，这是最为简单的酶反应器。现代的固定化酶反应器是将酶固定在单体上，这实际上是一种特殊的催化剂型固定相衍生化试剂。酶的专一性强，因此该方法选择性高。经过固定化后的酶稳定性大大提高且可重复利用。但是体系环境需要防止酶失去活性，对体系环境相对严格。

光化学衍生化是是色谱柱流出组分在光照射下发生某种反应的过程。应用的反应类型有：氧化-还原、光分解或光水解、光离解、分子重排、加成或消除、环化、光聚合等各种反应。该技术是一种柱后衍生技术，装置简单。只需在色谱柱与检测器间安装一个光源和反应管。光源可用紫外灯和激光光源，与之匹配的检测器有紫外-可见光检测器、荧光检测器和电化学检测器。

相对应的，成功的光化学反应需满足以下条件：

（1）待测组分应为芳香烃或共轭不饱和化合物；

（2）色谱洗脱液在上述波长光下无吸收；

（3）光源有足够光通量；

（4）光化学反应迅速；

（5）反应产物稳定。

光化学衍生化已被广泛应用于药物的HPLC分析，研究最多的是它莫昔芬及其代谢物的光化学衍生化。

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

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