药物液相色谱分析-1

鉴于生物样品的复杂性，采用HPLC分析样品时需将样品进行预处理，其中包括沉淀蛋白、溶剂萃取或固相萃取等，这样做可以排除基质干扰、浓缩待测组分和延长色谱柱使用寿命的作用。目前拥有的柱切换HPLC技术能够在进样的同时完成在线净化、富集样品。接着，浸透限制固定相对生物样品直接进样技术有了进一步的重大突破。该技术时在固定相填料表面覆盖一层亲水层，亲水层允许小分子物质自由出入，而大分子物质便会产生排阻作用，这种选择性使得大分子随流动相流出，小分子物质进一步得到分离。

目前常见的浸透限制固定相主要有四种，第一种是内表面反相固定相（ISRP）。该类固定相是由硅胶与γ-缩水甘油醚丙基三甲氧基硅烷反应制得的新型固定相，它具有外表面亲水和内表面熟睡的特殊浸润性。具有亲水的外表面和疏水的内表面。

半透表面固定相（SPS）是一种双相型固定相，外层是将聚氧乙烯聚合物键合于硅胶上形成半透性亲水表面，内层则是常规的反相键合相。小分子物质通过与SPS外层聚氧乙烯表面的氢键键合作用及内层反相表面的疏水作用而得到分离。其优点是内外表面可独立键合，键合密度和性质可以控制。

屏蔽疏水相固定相（SHP）是指在硅胶颗粒的内外表面键合亲水网状物，内有疏水的苯基，小分子物质可通过网状结构，大分子则被阻拦。该固定相稳定性和重现性良好。

混合官能团相固定相（MFP）是指在多孔硅胶表面同时键合亲水基团和疏水基团的固定相。该固定相特点是对于亲水性及疏水性药物均适用。

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