【摘要】 正常人尿样中的总卟啉（主要是粪卟啉、尿卟啉和七羧基卟啉）含量少于300nmol/L或25nmol/mmol肌酐。

正常人尿样中的总卟啉（主要是粪卟啉、尿卟啉和七羧基卟啉）含量少于300nmol/L或25nmol/mmol肌酐。卟啉症患者尿中卟啉排泄量增多。用直接分光光度法或荧光测定法可以测定尿中的卟啉总量,作为临床的初步检查。用RP-HPLC荧光检测卟啉游离羧酸时，样品（100pul上清液）可直接注射进HPLC（最好带保护柱)，贮存后的尿样中往往有沉淀产生，为了消除其对卟啉的吸附，应该用盐酸酸化样品，每5ml尿样加入0.2ml浓盐酸﹐混合后使沉淀溶解。如果需要浓缩样品，较早的方法是滑石吸附法﹐将尿样调节到pH3~5，加入滑石至上清液不再有荧光，用水洗去杂质后，或者用丙酮-1mol/L盐酸(9∶1)洗脱卟啉，或者用甲酯化试剂洗脱卟啉甲酯。较新的样品预处理方法是离线或在线固相萃取。

正常人粪便中卟啉总量少于200nmol/g干样，主要是原卟啉和少量粪卟啉。盐酸-乙醚提取法能提取粪样中的各种卟啉，样品与浓盐酸混合后，再用无过氧化物的乙醚提取，离心后，卟啉游离羧酸进入下层水溶液。提取液直接进样，但需要使用保护柱。我们使用固相萃取法既能分离杂质又能浓缩样品。将粪便样品与10%~20%的三氯醋酸-二甲基亚矾（1 ∶1）溶液匀浆混合，离心后取清液，用醋酸铵缓冲液稀释，并用反相固相萃取柱萃取卟啉﹐洗脱液可直接进样RP-HPLC或者在线洗脱进入分析柱”。如果需要制备成卟啉甲酯，可以将甲醇-硫酸(95∶5)直接加至样品中进行甲酯化，或者先提取得到酸性提取液后再进行甲酯化。

红细胞中主要含有原卟啉Ⅳ和原卟啉Ⅳ锌络合物，测定血中的卟啉和原卟啉锌对于区分诊断铅中毒和缺铁性贫血等有重要意义。进行HPLC测定前必须定量地提取卟啉和原卟啉锌，保证锌络合物不离解。且提取液不应含有高铁血红素及血红蛋白，因为它们都有荧光熄灭作用，妨碍卟啉的荧光检测。

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