【摘要】 逆转录病毒作为一种转基因载体工具用于细胞的基因组编辑已经有超过20年的历史了。

逆转录病毒作为一种转基因载体工具用于细胞的基因组编辑已经有超过20年的历史了。现在已经有大量的实验室使用不同种属来源的逆转录病毒建立了多种病毒载体。在众多的逆转录病毒载体中，慢病毒因为其独特优势成为了科学界中最主流的病毒载体之一。现有的慢病毒载体来源包括:人获得性免疫缺陌综合企病每(HIV-1和HIV-2)，猿、猫、牛属的免疫缺陷病毒（SIV，FIV，BIV)，山羊关节炎脑病病毒（CEAV)，马传染性贫血病毒（EIAV）和牛原发性JD病毒。

 

为了减少重组病毒载体序列的长度以及发生同源重组的风险，慢病毒包装系统中所使用的质粒包括辅助质粒和核心质粒均是在野生型病毒的基因序列上进行大量删减并添加一些异源序列构成的。这些修改包括：病毒核心质粒上两端的长末端重复序列(LTR）被部分用异源启动子和Poly A序列进行替代；慢病毒本身的包装信号被敲除；所有慢病毒本身的包膜蛋白被敲除，改由另-种病毒包膜蛋白―—―水疱性口膜炎病毒的糖蛋白包膜(VSVG）来进行包装，这样一来就可以大大增加病毒的宿主来源。

 

现代慢病毒载体做的改进还包括了部分内含子地添加。一些基因（如β-globin)的高表达是需要内含子存在的。还有一项非常重要的改进就是一类新顺式作用元件地添加。通常添加的顺式作用元件主要是关注重组蛋白地表达，但是现在一些转录后修饰元件也被引入慢病毒载体构建中。

 

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