【摘要】 体外抗菌实验简介:体外测定微生物对药物敏感程度的实验,该实验称为抗菌实验,分为抑菌实验和杀菌实验,前者是 抑制细菌的生长繁殖,但不能杀菌,在药物去除后,微生物还可以继续生长
项目简介:
一、体外抗菌实验简介:体外测定微生物对药物敏感程度的实验,该实验称为抗菌实验,分为抑菌实验和杀菌实验,前者是 抑制细菌的生长繁殖,但不能杀菌,在药物去除后,微生物还可以继续生长;后者是能杀死微生 物,在药物去除后,微生物不能再生长繁殖。
二、抗菌实验检测方法
1. 液体培养抑菌检测(OD值测量 ) 实验操作: 分别于LB培养基中220 rpm ,37℃条件下培养大肠杆菌DH5α至OD600为0.6左右,对应108个CFU/mL的浓度,按 1:1000的稀释比例将菌液稀释至终浓度为105个CFU/mL,分别将15w紫外照射灭菌20分钟的待测样品加入到3 mL的菌 液中(每组设定两个平行重复,样品均完全浸没于菌液中),37℃,220 rpm条件下培养24 h后测定OD值。 对接注意事项:
1).样本自带对于OD测试有有影响的因素,对于实验结果有影响;
2).默认三次重复,确认待测样本的实验用量;
3).对于块体样本,计算好客户提供样本数量;
2.固体平板培养基抑菌检测(抑菌圈测量) 实验操作: 分别于LB培养基中220 rpm ,37℃条件下培养大肠杆菌DH5α至OD600为0.6左右,108个CFU/mL的浓度, 以1:1000的体积比将菌液和融化的固体培养基混合,每个培养皿(直径为90 mm)中倒入10 mL混合培养基, 凝固后备用。分别加入待测样品,37℃培养24小时候拍照。
实验方法: a.直接接触法;b.滤纸片法;c.打孔法;d.挖沟法
3.平板涂布计算菌落数(抑菌率测定)