【摘要】 大部分利用透射电子显微镜和其他结构生物学技术进行研究的生物学课题,他们的理论基础都是亚细胞分离、蛋白质和病毒纯化的生化技术。

大部分利用透射电子显微镜和其他结构生物学技术进行研究的生物学课题,他们的理论基础都是亚细胞分离、蛋白质和病毒纯化的生化技术。生化提纯技术的发展对于早期利用透射电子显微镜对病毒颗粒及其蛋白质和核蛋白成分的研究至关重要。

从20世纪40年代初发展起来的树脂/塑料包埋样品的薄切片技术是从光学显微镜显微切割术发展而来的,这项技术通常被称为超微切割术。因此,使用玻璃和后来的钻石刀具制造超微切割机,对所有电子显微镜实验室的发展至关重要。除了薄层切片,还需要了解组织固定和包埋前染色、脱水、树脂渗透聚合以及薄片包埋后染色。

切割后的薄片不仅能够显示组织和细胞超微结构的细节,还能示病毒颗粒(包括细胞内的病毒晶体)、胶原、骨骼肌肌球蛋白、角蛋白和中间丝、淀粉样纤维、染色质以及细胞内有晶状微体和蛋白质闭塞现象;在颗粒水平上,能够检测到糖原、核糖体和大的蛋白质分子,如铁蛋白(其氢氧化铁核心的存在)、高相对分子质量的软体多糖血蓝蛋白和环节类血红蛋白(红血球蛋白);在膜结构中,主要用于观察分子顺序,例如在线粒体脊、核膜、质膜缝隙连接、细菌、藻类和真菌细胞壁,以及膀胱腔膜内。组织内的细胞外胶原纤维和纤维束由于其具有规则的宽度和线条带,很容易通过薄切片来制备,同样,骨骼肌细胞内的肌原纤维阵列最初也是通过薄切片定义的,这对Hugh Huxley和Jean Hanson提出的肌肉收缩滑动细丝理论做出了巨大的实验支撑。

 

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