【摘要】 扫描电镜利用电子束获取细胞的形态信息，反映细胞在不同培养条件下的反应。拉曼光谱被用于测定生物质中存在的聚合物(PHB)。

已知许多微生物(如细菌、酵母、藻类)形成由细胞和细胞外基质组成的多层结构。这种形成被称为生物膜。阐明生物膜形成的基本机制及其对细胞内聚酯形成的影响将有助于更深入地了解这一过程背后的基本生化机制，并为利用细菌进行生物技术应用开发新的更有效的策略。

研究浮游生物和生物膜细胞运用扫描电子显微镜(SEM)和拉曼光谱技术。扫描电镜利用电子束获取细胞的形态信息，反映细胞在不同培养条件下的反应。拉曼光谱被用于测定生物质中存在的聚合物(PHB)。Hrubanova K的研究在含葡萄糖(20 g/l)作为唯一碳源的矿物培养基中培养糖伯克霍尔德菌[1]。在搅拌(80 rpm) CDC生物膜生物反应器中进行培养，温度设置为30℃。培养72 h后，从玻璃片上轻轻收获生物膜细胞，通过离心(5000 rpm, 5 min)收集浮游细胞，并用冷冻扫描电镜(cryo- sem)进行观察。浮游细胞和生物膜细胞均采用冷冻扫描电镜成像。冷冻采用丙烷喷射技术(JFD030;Bal-Tec，巴尔查斯/徕卡微系统，维也纳)。冷冻后，将样品置于液氮下的双断裂冷冻级上，在低温高真空穿梭机VCT100 (Leica microsystems, Vienna)的惰性气体下转移至-140℃的预冷冷冻断裂装置ACE600 (Leica microsystems, Vienna)。然后将样品破碎并在-95℃下升华5分钟，以去除沉积的残余冷凝水和冰晶。最后，利用VCT100航天飞机在高真空和低温下将其转移到预冷(-120°C)麦哲伦400/L (FEI)低温扫描电镜下进行成像，电子束为1 keV，束流为6.3 pA，无金属涂层。

  • Hrubanova K , Krzyzanek V , Samek O ,et al.Morphological and Production Changes in Planktonic and Biofilm Cells Monitored Using SEM and Raman Spectroscopy[J].Microscopy and Microanalysis, 2017, 23(S1):1158-1159.

 

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