用于生物透射电子显微镜的新型通用染色试剂

自从引入重金属盐作为生物材料透射电子显微镜的通用染色试剂以来，乙酸铀酰已被广泛用作极好的染色剂，不仅用于塑料包埋组织和细胞的薄片，还用于生物大分子的高对比度阴性染色。引入一种能够与高性能铀酰盐相匹配的安全替代品是全球迫切需要的。一些实验室已经进行了类似的尝试，其中大部分是日本作者。他们研究了铂蓝、乌龙茶提取物和氯化铪的性能，其中一些可以作为新的染色剂在市场上买到。这些研究主要针对塑料嵌入的薄片，很少有作者提到它们作为阴性染色试剂的用途。受乙酸铀酰化学性质的启发，我们测试了各种重金属盐，发现钆和钐的三乙酸盐可能是我们目前目的的合适候选者。Brenner和Horne^[1]是最早引入阴性染色技术来探索大分子组装的总体结构的人之一。他们展示了烟草花叶病毒和其他一些嵌入2%磷钨酸钠层中的材料的负对比图像。自从van Bruggen等人^[2]报道了二乙酸铀酰UO₂（CH3COO）₂作为阴性染色的高对比度介质以来，各种铀酰盐经常被用作通过透射电子显微镜观察生物大分子复合物分子间或分子内结构细节的有用染色剂。尽管此后又引入了几种试剂进行阴性染色，但在图像对比度方面，还没有任何与铀酰盐类似的报道。因此，我们测试了新型重金属盐作为阴性染色试剂的性能，探讨了它们是否可以用作乙酸铀酰的替代品。

[1] Brenner S, Horne R W. A negative staining method for high resolution electron microscopy of viruses[J]. Biochimica et biophysica acta, 1959, 34: 103-110.

[2] Van Bruggen E F J, Wiebenga E H, Gruber M. Negative-staining electron microscopy of proteins at pH values below their isoelectric points. Its application to hemocyanin[J]. Biochimica et Biophysica Acta, 1960, 42: 171-172.

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