【摘要】 此外,由于缺乏选择性检测ROS和RNS物种的特异性探针,通过流式细胞术进行ROS分析是具有挑战性的。为了解决这些问题,我们已经开发了一些新的ROS和RNS探针,它们具有针对不同ROS和RNS物种的高选择性。
活性氧类(ROS)和活性氮(NOS)是参与细胞损伤和健康问题的重要生物调节剂。姜黄素是一种天然的酚类化合物,能有效抑制活性氧的产生,长期以来被认为是一种有前途的抗癌药物。然而,ROS是一种氧化物的混合物,姜黄素对不同氧化分子的作用尚不清楚。此外,由于缺乏选择性检测ROS和RNS物种的特异性探针,通过流式细胞术进行ROS分析是具有挑战性的。为了解决这些问题,我们已经开发了一些新的ROS和RNS探针,它们具有针对不同ROS和RNS物种的高选择性。
T淋巴细胞Jurkat细胞负载:(1)ROSGreen用于测量总ROS;(2)用于检测超氧化物的MitoROS580;(3)用于靶向一氧化氮的亚硝酸橙和用于探测过氧亚硝酸根的(4)DAX-J2PONGreen。染色1小时后,将细胞与各种氧化剂孵育以触发特异性ROS或RNS。流式细胞仪分析结果表明,在没有姜黄素处理的情况下,用氧化剂刺激细胞后,细胞中的荧光信号显著增加。相反,姜黄素的添加以剂量依赖的方式显著降低了细胞内总ROS、超氧化物和过氧亚硝酸盐的水平。
研究结果显示,这些新探针对目标ROS或RNS的选择性高于其他竞争物种,并且在通过流式细胞仪实时定量监测细胞内ROS和RNS产生和姜黄素抑制方面具有良好的适用性。总之,我们提供了一个稳健的方法来监测活细胞中不同的ROS和RNS,以及筛分潜在的抗氧化剂治疗各种ROS和RNS相关疾病。
- Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Yunting Xi, Ruogu Peng, Jennifer Liao, Jack Diwu, 222 - Flow Cytometric Analysis of Intracellular ROS and RNS Production and Curcumin Inhibition, Free Radical Biology and Medicine, Volume 100, Supplement, 2016, Pages S103-S104, ISSN 0891-5849, https://doi.org/10.1016/j.freeradbiomed.2016.10.263.
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