【摘要】 该平台将反相液相色谱（LC）与在线流式细胞术（FC）和质谱（MS）相结合。作为一个模型，在稳定过表达α-7烟碱乙酰胆碱受体（α7-nAChR）的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中使用了功能性钙通量测定，α-7烟碱乙酰胆碱受体是中枢神经系统（CNS）相关疾病的潜在治疗靶点。

液质联用仪主要应用于药物代谢及药物动力学研究、临床药理学研究、天然药物（中草药等）开发研究、新生儿筛选、蛋白与肽类的鉴定、残留分析、毒物分析、环境分析－公安、环保、食品、自来水、卫生防疫等行业。

例如Reka等人建立了一个新的平台，用于快速有效地筛选复杂天然混合物中的生物活性化合物，使用基于细胞的测定[1]。该平台将反相液相色谱（LC）与在线流式细胞术（FC）和质谱（MS）相结合。作为一个模型，在稳定过表达α-7烟碱乙酰胆碱受体（α7-nAChR）的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中使用了功能性钙通量测定，α-7烟碱乙酰胆碱受体是中枢神经系统（CNS）相关疾病的潜在治疗靶点。同时，该团队设计了耦合LC-FC系统，采用神经母细胞瘤细胞，然后在激动剂和混合拮抗剂-激动剂试验模式下对联用设置进行分析和药理学评估。使用标准受体配体，验证了药理学反应和标准化的良好测定质量参数。筛选系统的适用性是通过分析各种类型的天然样品来评估的，例如烟草植物提取物和蛇毒（混合拮抗剂-激动剂试验模式）。生物活性反应与化合物各自的精确质量直接相关。同时使用功能激动剂和拮抗剂反应，分别从烟草提取物和蛇毒中检测到尼古丁和已知的神经毒素。因此，所开发的分析筛选技术代表了一种快速测量功能细胞反应和平行分离和鉴定复杂混合物中靶向α7-nAChR化合物的新工具。预计其他快速反应的基于细胞的测定（例如其他离子通量测定）可以纳入该分析装置。

 

[1] Reka A. Otvos, Pim van Nierop, Wilfried M. A. Niessen, et al. Development of an on-line cell-based bioactivity screening method by coupling liquid chromatography to flow cytometry with parallel mass spectrometry[J]. Analytical Chemistry, 2016, 88(9):4825-4832.

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