【摘要】 在确定使用哪种测定法时，应进行初步研究，以确定哪种是最佳测定法以及何时应用。

细胞活力通常被定义为样本中健康细胞的数量。在一段时间内重复使用用于确定生存能力的相同测定来研究群体内的细胞增殖。

 

细胞活力方法大致可以分为分析整个群体的方法和涉及单个细胞分析的方法。最早评估细胞活力的方法之一是台盼蓝染料排除法，该法至今仍被广泛使用。其原理是活细胞具有完整的细胞膜，因此可以排除台盼蓝染料。死亡细胞吸收台盼蓝，因此呈现蓝色，因为它们的膜不再能够控制大分子的通过。

 

在确定使用哪种测定法时，应进行初步研究，以确定哪种是最佳测定法以及何时应用。Mosmann[1]开发的96孔测定法显著提高了代谢染料MTT的容量。其他类似的染料已经变得越来越流行，如XTT、MTT、MTS和WST衍生物这增加了它们的灵敏度。

 

O’Brien等人[2]基于Resazurin的方法，提出了可以通过比色法或荧光法测量的优点，以及使用荧光特性可以获得更高的灵敏度，其中只有80个细胞可以给出可重复和敏感的信号。然而，在更高的细胞密度下测量荧光时必须小心，以避免过度还原为无色和非荧光的氢化间苯二酚。

 

所有基于还原的测定必须在培养基中没有任何细胞的情况下进行测试，以确定与待测试化合物的任何交叉反应性。

 

[1] Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays[J]. Journal of immunological methods, 1983, 65(1-2): 55-63.

[2] O'brien J, Wilson I, Orton T, et al. Investigation of the Alamar Blue (resazurin) fluorescent dye for the assessment of mammalian cell cytotoxicity[J]. European journal of biochemistry, 2000, 267(17): 5421-5426.

 

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