【摘要】 目前有两种技术可以稀释冷冻保存的生物样本，这些样本太厚而无法通过ECT进行研究，其中包括几乎所有的真核生物和许多细菌和古细菌细胞。

电子冷冻断层扫描(ECT)是细胞内大分子结构直接成像的最高分辨率技术[1]。虽然近原子分辨率晶体学方法和单粒子低温电子显微镜可以提供单个细胞“拼图块”的图像，但ECT提供了这些碎片如何在细胞内聚集在一起的图像。此外，有许多复杂的动态结构只在细胞内组装，突出了体内结构生物学在追求细胞现象的分子理解中的重要性。

 

十多年来，病毒学家和微生物学家已经见证了电痉挛疗法的好处，因为完整病毒和大多数细菌的体积很小。1微米厚)，这使它们成为这种研究的理想生物样本。事实上，电痉挛疗法给这些领域带来了深刻的结构见解，并提供了理由，期望对电痉挛疗法尚未探索的广阔细胞空间的调查将提供关于细胞内部工作的不可预见的知识。

 

目前有两种技术可以稀释冷冻保存的生物样本，这些样本太厚而无法通过ECT进行研究，其中包括几乎所有的真核生物和许多细菌和古细菌细胞。其中一种方法是冷冻切片，使用超低温显微镜切割高压冷冻材料的薄片，类似于传统的塑料嵌入材料切片。第二种方法是低温聚焦离子束(cryo-FIB)铣削，它使用一束聚焦的镓离子来烧除样品中不需要的部分，留下一小部分低温保存的材料。

 

在过去的几年里，冷冻fib铣削技术受到了广泛的关注，因为它提供了一种“更温和”的细胞变薄方法，但这两种技术在与ECT结合使用时都有各自的优点，也有需要克服的障碍[1]。

 

[1]Matthew T Swulius and others, Electron Cryotomography of Vitreous Cryosections and Cryo-Focused Ion Beam Milled Lamellae., Microscopy and Microanalysis, 2017, 23(S1): 2314-2315.

 

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