【摘要】 报告了结合使用原子力显微镜 (AFM) 和几种类型的光学/荧光/激光扫描显微镜来研究细胞。

当前生物和医学领域的进步与方法和研究技术的改进有关[1]

 

在过去的十年中,与细胞生物学应用相关的最重要的问题之一是检测细胞在其天然和动态环境中遵循的过程[2]。光学显微镜的使用提高了细胞宏观特征分析结果的质量。特别是,传统的显微镜光学可以更快、更直接地观察固定或活细胞以及各种成像模式,包括荧光。

 

由于光学技术对于细胞过程的生物解码至关重要,因此机械性能的研究需要新技术的开发和评估[3]。其中,原子力显微镜(AFM)是最重要的之一。 AFM 的巨大优势在于能够进行无损测量,除了良好的横向分辨率之外,还在于“液体模式”。

 

报告了结合使用原子力显微镜 (AFM) 和几种类型的光学/荧光/激光扫描显微镜来研究细胞。结果表明,AFM 与光学显微镜的混合系统能够详细研究细胞表面特性(例如形貌)、机械特性(例如杨氏模量)力传导现象,并能够深入了解生物相关途径和细胞复杂纳米世界的机制。

 

目的是展示几种类型的光学/荧光/激光扫描显微镜与 AFM 相结合用于研究细胞室中纳米结构组织的潜力/发展。通过将高分辨率光学显微镜(例如 STED)与 AFM 并行使用,已经证明不仅可以在分子尺度上研究细胞的形态力学特性(例如杨氏模量),而且还可以深入了解细胞的形态力学特性。细胞途径和机制的复杂性。

 

此外,关于细胞对外部化学或机械输入的反应的重要问题仍然(几乎)没有得到解答。未来的答案可能是先进混合系统的新发展(例如,新的 AFM 1 拉曼/X 射线/电子显微镜),该系统可以同时向 AFM 提供化学指纹。

 

[1]Axelrod D. 1981. Cell-substrate contacts illuminated by total internal reflection fluorescence. The J Cell Biol 89:141–145.

[2]Calzado-Martin A, Encinar M, Tamayo J, Calleja M, San Paulo A. 2016.Effect of actin organization on the stiffness of living breast cancer cells revealed by peak-force modulation atomic force microscopy. ACS Nano 10:3365–3374.

[3]Cazaux S, Sadoun A, Biarnes-Pelicot M, Martinez M, Obeid S, Bongrand P, Limozin L, Puech PH. 2016. Synchronizing atomic force microscopy force mode and fluorescence microscopy in real time for immune cell stimulation and activation studies. Ultramicroscopy 160:168–181

 

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