生物透射电子显微镜-云现场
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项目简介
云现场”实验是科学指南针推出的一款黑科技视频网络体验,用户只需要一部电脑或者移动设备,即可在任何时间、任何地点发起或参与测试过程,实现各种信息的实时共享与协作。测试过程实时直连测试仪器屏幕,与测试老师一对一沟通选区拍摄,所见即所得,媲美现场实验。
生物透射云现场分为制样和云现场拍摄两部分,两部分单独计费,制样包括超薄切片及负染色制样。
一、预约云现场注意事项:
2、抽真空时间含在测试总时长内,即从样品进仓开始计时,一般在5min左右
3、测试项目仅拍摄形貌,无能谱。
4、云视频测试时长1h起约,不同样品拍摄速度不均一,平均下来,拍摄速度一般2-3个样/小时(仅供参考),需要拍摄高倍并且仔细找特殊形貌的样品一般拍摄速度更慢些,具体请根据实际拍摄要求准确预约时长;
5、最好不要超时,一般情况下,后面会安排其他客户测试,尽量预约足够时间,比如约了 2 小时,最多可测试时间是 2 小时,2 小时后会结束测试,请合理安排时间;如果后面时间 没有其它客户,可以适当延长,费用按实际最终测试总时长计算,多退少补;
6、如临时有事需取消预约,请提前 24 小时联系,可以免费取消,如未提前告知,造成机时损失,按预约时间半价收费;
7、在拍摄过程中遇到问题您有权随时叫停测试,拍摄过程遇到的问题或这不认识的细胞器可以直接和工程师沟通,最终测试费用会根据实际测试时长多退少补。
8、请不要迟到,云视频拍摄链接一般拍摄前5分钟发到拍摄群;
二、制样步骤(科学指南针完成)
1、倒掉固定液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;
2、用1%的锇酸溶液固定样品1-2h;
3、小心取出锇酸废液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;
4、用梯度浓度(包括30%,50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处5)理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理20min;最后过渡到纯丙酮处理20min。
5、用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=1/1)处理样品1h;用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=3/1)处理样品3h;纯包埋剂处理样品过夜;将经过渗透处理的样品包埋起来,70℃加热过夜,即得到包埋好的样品。
6、样品在超薄切片机中切片,获得70-90nm的切片,切片经柠檬酸铅溶液和醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液各染色5-10min,晾干后即可在透射电镜中观察。
三、测试周期
全套测试周期为收到样品后2-3周左右,具体测试时间根据机时排期确定。
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结果展示
交付内容:
每样提供10张拍摄图片(不提供分析服务),如需照片数量超过10张,按照40元/张收费。
结果反馈请在测试完成一周内,不建议回收样品,如有需要请提前反馈给指南针工作人员。
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图1. I和II是纳米材料进入细胞切片局部和放大图;III是材料附着细胞表面的细胞切片图 | |
图2.金黄色葡萄球菌在低于药物MIC作用后细胞壁发生溶解 | |
图3.小球藻细胞形态 | 图4.斑马鱼组织 |
样品要求
服务流程:
送样方式:
可接收固定好的细胞/组织样品并附有详细送检要求的预约单。
①需要您提供的样品:收集细胞/组织取样(新鲜迅速取材),置于1.5ml离心管内,加入2.5%的戊二醛溶液(固定液加满离心管,使样品完全浸没在固定液中),可放置于4°C保存,请不要倒弃固定液,一般固定12h后可寄送(务必采用1.5ml离心管寄送)。
②打印填写完整的预约单和样品一起寄送。
具体取材及固定方法如下:
生物透射电镜送样要求-PDF
其他类型样品前处理可与指南针工作人员沟通!
常见问题
1. 2.5%戊二醛固定液如何配置?
市售25%戊二醛水溶液 10ml
0.2M磷酸盐缓冲液(pH7.0) 50ml
蒸馏水加至 100ml
2. 0.2M,pH7.0磷酸缓冲液的配置方法?
A液:Na2HPO4·H2O 31.61g,或者Na2HPO4·7H2O 53.63g,或者Na2HPO4·12H2O 71.64g,加蒸馏水至1000ml
B液:NaH2PO4·H2O 27.6g,或者NaH2PO4·2H2O 31.21g,加蒸馏水至1000ml
0.2M,pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml(合起来是100ml)