【摘要】 荧光显微镜的组成包括被观察的荧光分子、光源、激发光滤光板、分光镜以及辐射光滤光片。

荧光是生物和分析显微镜中最常用的物理现象之一,那么什么是荧光呢?当具有荧光特性的物质受到波长较短的激发(excitation)光的激发时,发出的波长较长的辐射(emission)光就被称作荧光。荧光显微镜就是以紫外线为光源,照射被检测的样品物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置的仪器。

荧光显微镜的组成包括被观察的荧光分子、光源、激发光滤光板、分光镜以及辐射光滤光片。荧光显微镜的光源通常采用的是由石英玻璃制作的超高压汞灯,它的中间呈球形,内部充斥着一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,水银分子不断解离和还原过程中发射光量子放出很强的紫外和蓝紫光,足以激发各类荧光物质。滤色系统是荧光显微镜的重要部位,由激发滤板和压制滤板组成。激发滤板会根据波长来激发样品内一个特定的染料,滤光板作为一种质量控制,只让特定的荧光团发射的波长通过。激发滤板分薄厚两种,一般暗视野选用薄滤板,亮视野荧光显微镜可选用厚一些。基本要求是以获得最明亮的荧光和最好的背景为准。压制滤板的作用是完全阻挡激发光通过,提供相应波长范围的荧光。反光镜的反光层通常是镀铝的,因为铝对紫外光和可见光的蓝紫区吸收少,反射达90%以上,相差聚光器与相差物镜配合使用,可同时进行相差和荧光联合观察,既能看到荧光图像,又能看到相差图像,有助于荧光的定位精确。

 

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