【摘要】 荧光显微镜是利用紫外线为光源照射被检物体,使之产生荧光并进行观察的显微光学观测技术,现已广泛应用于医学研究、诊断领域里。

荧光显微镜是利用紫外线为光源照射被检物体,使之产生荧光并进行观察的显微光学观测技术,现已广泛应用于医学研究、诊断领域里。下面介绍一下荧光显微镜的使用方法及注意事项。

在使用荧光显微镜之前,必须例行检查荧光装置的灯丝对中、光路对焦、孔径光阑、视场光阑设置等状况;检查光源与暗视野聚光器之间是否装上了所要求的激发滤片,通过旋转物镜架来转换物镜,观察物镜配置是否得当;检查物镜的后面是否装上了相应的压制滤片。检查完毕后将卤素灯电压调至最低,打开灯源,超高压汞灯要预热15min才能达到最亮点。荧光光源汞灯使用寿命很短,汞灯电源开关之间的隔时间必须大于三十分钟,以延长汞灯的使用寿命和安全。低倍镜观察时,应使用荧光显微镜的调节装置,调整光源中心,使其位于整个照明光斑的中央,不能用手直接触摸光学部件的表面,以免留下手指印在上面,影响观察效果。放置标本片时,应检查样品载体有否挂有液体、灰尘,载玻片的厚度是否在物镜标定的工作距离范围内。调整焦距后即可观察,注意:未装滤光片不要用眼直接观察,因为照明光源含有紫外线,应在载物台前上方放一块棕色遮光板,以防紫外线损伤视网膜。一般暗视野荧光显微镜和用油镜观察标本时,必须使用镜油,最好使用特制的无荧光镜油。最后注意电压不稳会降低高压汞灯的使用寿命,光源电源应装配稳压器。

 

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