【摘要】 本指南详细解析移液器的正确操作步骤(包括吸液、放液、预洗等)、使用注意事项(如操作角度、温度差异、液体性质处理)和保养细节(日常清洁、定期校准、正确存放),旨在帮助实验人员提升数据准确性、延长仪器寿命,避免常见误用导致的误差和损坏。

移液器(俗称“移液枪”)是实验室最常用但也最容易被误用的工具之一。实验中常常出现倒吸、不准等情况,这些都与移液器操作使用行为不规范相关。

接下来详细说一下移液器使用规范:

 

一、 正确使用方法 (以空气置换式移液器为例)

遵循正确的步骤是获得精确和可重复结果的基础。

1.选择与安装吸头:

选择与移液器量程匹配的正确规格的吸头。

将移液器垂直插入吸头盒中,轻轻用力并稍微旋转即可确保气密性。切勿用力过猛撞击,这会损坏移液器锥柄。

2.量程设定:

从高量程调节至低量程:先顺时针调过目标量程,再逆时针缓缓调回至目标值。这可以消除机械背隙带来的误差。

切勿超过量程范围:严禁将移液器的体积调节钮旋出其标定的最小或最大范围,这会永久损坏内部机构。

3.预洗吸头:

对于高精度的实验,在正式移液前,可先吸放液体2-3次。这能使吸头内壁达到吸附平衡(尤其是有机溶剂或粘稠液体),提高准确性。

4.吸液:

将移液器垂直浸入液面以下2-4毫米(深度根据吸头和液体量调整,但不宜过深)。

慢、平稳地松开操作杆至第一停点(First Stop)。快速释放会导致液体冲入锥柄,造成污染和体积不准。

在液面中停顿一秒钟,确保液体完全吸入。

5.放液:

将吸头尖端以一定角度(通常10-45度)贴靠在接收容器的内壁上。

缓慢按压操作杆至第一停点,排出液体。

继续按压至第二停点(Second Stop/Blow Out),将剩余液体完全吹出。

按住操作杆,将吸头平行移出容器,然后松开操作杆。

 

二、 使用注意事项

1.操作角度:

吸液和放液时,尽量保持移液器垂直。倾斜会导致液柱高度变化,引入压力误差,从而影响吸液体积的准确性。

2.温度差异:

移液器校准是在水中(~4°C ΔT)进行的。如果液体密度、粘度、蒸气压与水不同(如有机溶剂),会产生误差,需要进行密度校正。

液体、移液器和吸头的温度应与环境温度平衡。手持移液器会使其升温,影响冷液体的体积。

3.液体性质:

高挥发性液体(如乙醚、丙酮):容易在吸头内形成气泡,导致体积不准。建议采用“反相移液法”:吸液时按到第二停点,放液时只按到第一停点,吹出的部分为多余量。

高粘度液体(如甘油):吸放液速度要更慢,以保证液体完全排空。建议使用反向移液法或外活塞式移液器。

易起泡液体:使用慢速吸放模式,或使用低吸附吸头。

4.吸头浸入深度:

浸入过浅:容易吸入空气。

浸入过深:液体会附着在吸头外壁,造成污染和体积误差。

5.切勿平放:

尤其是带有残液的移液器,平放会导致液体倒流至移液器内部,污染活塞和密封圈,导致腐蚀和损坏。应将移液器挂在移液器架上。

6.匹配的吸头:

使用原厂或高质量、匹配的吸头。劣质吸头可能导致气密性不佳,严重影响准确性和精密度。

 

三、 保养细节

定期的保养和校准是保证移液器长期稳定工作的关键。

1.日常清洁:

外部:用蘸有75%酒精或稀释消毒剂的软布擦拭移液器外表面,特别是手柄和锥柄部分。切勿将整支移液器浸泡在液体中。

内部(如发生污染):如果液体倒吸入活塞,需要立即拆卸清理。参照说明书取下锥柄和吸头推出器,用清水或适当溶剂清洗,晾干后再重新组装。

2.定期校准:

频率:根据使用频率和实验要求,通常建议每6到12个月进行一次专业校准。对于要求极高的关键实验(如qPCR、ELISA),应增加校准频率。

方法:使用精密天平和超纯水,在室温下进行重量分析法测量。计算准确度(Accuracy)和精密度(Precision/CV值)。如果超出允许误差范围,则需要由专业人员进行调整或维修。

3.正确存放:

将量程调至最大量程,以放松内部弹簧,延长使用寿命。

存放在干燥、清洁、无腐蚀性气体的环境中,并竖直放置在移液器架上。

4.密封圈润滑:

长期使用后,活塞的密封圈会磨损和干燥。在进行校准时,专业人员通常会涂抹专用的硅脂进行润滑,以保证其密封性和滑顺度。切勿使用其他润滑油。

5.使用记录:

为每支移液器建立“档案”,记录其使用情况、校准日期和维修历史,便于追踪和管理。

 

移液器使用与维护核心要点总结

核心支柱

关键要旨

具体体现

精准操作

规范、稳定是获得可靠结果的前提。

垂直操作、慢吸慢放、预润洗、贴壁吹净。

细致呵护

预防优于维修,日常使用中杜绝一切可能损坏仪器的行为。

严禁超量程、严禁平放(防倒流)、使用匹配优质吸头、轻拿轻放。

定期养护

校准与清洁是维持其长期性能的生命线。

定期专业校准(建议每年1-2次)、日常外部清洁、及时处理液体倒流污染、最大量程存放以放松弹簧。

 

移液器的精确操作和悉心维护是保障实验数据准确性、可重复性的基石,同时也是保护昂贵仪器、降低实验成本的关键举措。将移液器视为您精密的实验伙伴而非简单工具。通过培养规范的操作肌肉记忆、建立谨慎的使用习惯并执行严格的维护计划,您将能有效提升实验效率与数据质量,并显著延长其使用寿命。

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