冷冻电镜测试

上世纪70年代，科学家首次提出了一种能在超低温下用透射电子显微镜观察样品的显微技术，并命名为冷冻电镜技术(cryoelectron microscopy) ，经过近10年的发展，该项技术在80年代已经非常成熟。

当科研人员需要观察病毒、膜蛋白、肌丝、蛋白质核苷酸复合体、亚细胞器等对温度非常敏感的样品的形貌时，可以将样品冷却至液氮温度，这样能够降低电子束对样品的损伤，减小样品的形变，从而得到更加真实的样品形貌。传统的核磁共振波谱学只能研究小分子量样品，而冷冻电子显微镜技术，既可以测试大分子量的、难以结晶的生物大分子结构样品，也可以测试小分子量样品，对于样品的分子量没有限制。相对于普通X-射线晶体学，冷冻电子显微镜技术要求的生物样品既可以具有二维晶体结构，也可以是非晶体结构。另一方面，生物样品是通过快速冷冻的方法进行固定的，克服了因化学固定、染色、金属镀膜等过程对样品构象的影响，更加接近样品的真实状态。

冷冻电镜操作简单，方便管理，更具有极高的稳定性和重复性，它通过对样品的冷冻，可实现直接观察液体、半液体及对电子束敏感的样品。最近几年，冷冻电镜解析得到的生物分子的结构分辨率已经可以达到原子级分辨率，它已成为一种和X-射线晶体学技术互补的重要的生物大分子结构解析技术。冷冻电镜的延伸应用是冷冻电镜单颗粒技术，通过冷冻电镜单颗粒技术可实现单颗粒分析、电子断层成像和电子晶体学等方面的研究。

参考文献：

1. Wah chiu,Amy McGough,Michael B.Sherman and Michael F.Schmid.(1999)Trends in Cell Biology.9:154 -158.

2. Carragher,b.and Smith,P.R.(1996)J. Stuct.Biol.116:2-8.

3. Moffat k and Henderson R(1995)Curr Opin Struct.5:656-663.

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