【摘要】 流式细胞仪主要由四部分组成,它们是:流动室和液流驱动系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。

流式细胞仪主要由四部分组成,它们是:流动室和液流驱动系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。

流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成,它是流式细胞仪的核心部件,被测试的样品在这里被激光照射发出荧光供收集检测。流动室由石英玻璃制成,中央有一个长方形的小孔,仅允许单个细胞通过,其内部充满了鞘液,能够将样品环形包绕。通过液流压力的作用,单个细胞悬液从样品管匀速流出,此时鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,包绕在样品外围后从喷嘴射出,祥品流在鞘流的环包下被限制在液流的轴线上,形成流体动力学聚焦,从而得到准确的细胞荧光信息。流动室上装有压电晶体,受到振荡信号可发生振动。

激光源和光学系统是采用不同的光源对特异荧光染色的样品细胞进行照射,激发细胞产生荧光以供收集检测。常用的光源有弧光灯和激光,目前台式机大多采用氩离子气体激光器,光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。激光光束在到达流动室前,先经过透镜聚焦,形成约22×66um的光斑,这样激光能量更强,便于激发荧光染料。

流式细胞仪的光学系统由若干组透镜、滤光片和小孔组成,它们将不同波长的荧光信号分别送入到不同的电子测控器,通过光电转换器将样品细胞产生的荧光转变成电信号而进行测量的。其中光电倍增管(PMT)最为常用,它具有响应时间短,光谱响应特性好,光量子产额高,弱光测量性强等优点。

计算机分析器能够分析放大后的电信号,再经模-数转换器输往微机处理器编成数据文件,或存贮于计算机的硬盘和软盘上,或存于仪器内以备调用。存贮于计算机内的数据可以在实测后脱机重现,进行数据处理和分析,最后给出结果。

 

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