高效液相色谱-1

高效液相色谱（HPLC）实在经典液相色谱地基础上，引入气相色谱理论与方法通过高压泵传输流动相，选用高效固定相和高灵敏度检测器对组分进行实时监测，实现了液相色谱地高度自动化。

高效液相色谱与传统的经典液相色谱相比，分离分析原理并无不同。但是，经典液相色谱采用的固定相为装填在玻璃管中的多孔粗颗粒，流动相通过重力流动，柱口压力低，柱效低，分析时间长。而HPLC采用全多孔颗粒固定相装填在小口径不锈钢柱中，流动相高压传输泵入色谱柱，使得溶质地扩散、传质速率大大加快，以此获得短时间内的高效分离性能。

另外，HPLC与GC相比，克服了GC对检测物质低沸点、蒸汽压低的限制条件。在实际使用中，仅有20%的样品可利用气相色谱进行检测，而液相色谱可对80%以上的有机物进行检测。

HPLC具有以下特点：

（1）分离性能高：由于新型高效固定相填料的使用，柱效可以高达5000-30000块/m理论塔板数，远远高于气相色谱填充柱1000块/m理论塔板数。

（2）选择性高：由于液相色谱柱具有高柱效，并通过调节流动相的组成和配比的改变来控制分离过程的选择性。高效液相色谱可以分析不同类型的有机化合物和同分异构体，包括旋光异构体，并已在合成药物和生化药物的生产控制中发挥重要作用、

（3）检测灵敏度高：普通的紫外检测器最小检出量可达10^-9g；而荧光检测器可达10^-12g

（4）分析速度快：在高压泵的辅助下，每个样品的分析时间在几分钟到几十分钟内完成。

（5）少量制备：因为液相检测器的非破坏性，可在检测后实现对对应组分的回收、纯化制备。

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

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