高效液相色谱-5

在反相键合相色谱中，化合物的解缔程度不同会引起色谱的分离效果不佳，因此根据其解缔程度不同，经过调节，反相键合相色谱可分为离子抑制色谱法和离子色谱法。

在反相键和相色谱中，一些弱酸、弱碱的两性化合物存在弱解离情况，导致峰拖尾严重，分离效果不佳。通过调节和控制流动相pH，以此抑制样品组分的解离，增加其在固定相中的溶解度，以此达到分离的目的，这种方法叫做离子抑制色谱法。在该方法中，除了影响反相键合相色谱的共同因素外，流动相的pH也具有着重要的作用。

需要注意的是，在完成离子抑制色谱法试验后，应及时使用纯溶剂流动相冲洗色谱柱，保持基线稳定30 min以上，防止仪器流路被腐蚀、堵塞，固定相损坏等。

与之相对应的，叫做离子对色谱法，适用于解离程度较强的弱酸、弱碱、两性盐等，它们主要以解离后的离子状态存在于流动相，极性非常大，非极性键和相对其几乎没有保留作用，无法进行有效分离。因此，人们将离子对萃取原理引入高效液相色谱应用领域，提出了离子对色谱法。该方法是通过在固定相中添加与样品电荷性相反的离子，与样品构成离子对，从而增加其在非极性固定相的分配系数，大大改善分离效果。

在反相离子对色谱中，常用离子对试剂中，分离碱类通常采用磺酸盐离子对试剂，分离酸类多是采用四丁基季铵盐。

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

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