【摘要】 通过使用 LC-HRMS 方法，我们对 enocianina 进行了详细的定性和半定量分析，结果表明 enocianina 是一种富含多酚的提取物，其中花青素代表了重要但不是最具代表性的类黄酮类别。

Enocianina 是从葡萄果渣中提取的富含花青素的提取物。它在食品工业中被广泛用作着色剂，除了花青素外，还含有多种多酚。为了了解 enocianina 除了其着色作用之外，是否还可以提供潜在的健康益处应用，我们旨在全面表征四种商业 enocianina 的特征，并评估它们的自由基清除、酶促、抗氧化和抗炎活性。 LC-ESI-MS/MS 分析鉴定出 90 种植物化学物质。

 

通过半定量分析评估每种花青素的相对含量，其中锦葵素衍生物含量最丰富。 UV-VIS 光谱检测到多酚和花青素的总量分别为 23% 和 3.24%，表明花青素仅占总多酚的一小部分。多元线性回归分析表明，自由基清除活性与总多酚含量相关，与花青素含量无关。所有四种 enocianinas 均剂量依赖性地激活 Nrf2，并且这种活性与含儿茶酚的多酚含量相关。最后，所有 enocianinas 都表现出剂量依赖性抗炎活性，在最高测试浓度下，其与总多酚含量密切相关，并且可以通过自由基清除、Nrf2 激活和与多酚成分相关的其他机制来解释。

 

图 2. 锦葵素 3-O-(6″-咖啡酰)-葡萄糖苷的 LC-ESI-MS/MS 鉴定。 34.8 分钟处的色谱峰 (A)、同位素 (B) 和碎片 (C) 模式【1】。

 

每个离子峰的身份通过目标方法确定。首先根据准确的单一同位素质量并考虑氮规则计算分子式，然后在内部数据库中进行搜索，该数据库汇集了迄今为止通过 HRMS 在葡萄样品中鉴定的分析物。然后，在两个或多个同量异位素条目的情况下，通过匹配实验和模拟同位素模式并考虑 MS/MS 碎片来确认或鉴定该化合物。使用HMDB数据库和CFM-ID在线软件来分配碎片离子。

 

HMDB 包含约 200,000 种代谢物的实验和预测 MS/MS 谱，而 CFM-ID 可以使用质量碎片规则预测给定结构的碎片谱，然后与实验谱进行比较。作为示例，描述了锦葵素 3-(6”-咖啡酰)-葡萄糖苷的鉴定。图 2 显示了以正离子模式记录的 34.8 分钟洗脱峰的 MS 谱图，其特征在于 m/z 655.16528 处的单同位素质量。利用Xcalibur工具，通过比较模拟和实验同位素模式，计算并确认了分子式C32H31O15 +。然后，通过将 m/z 331 和 493 处的 MS/MS 片段与 HMDB 数据库中报道的锦葵素 3-O-(6”-咖啡酰基)-葡萄糖苷的 MS/MS 片段进行匹配，获得最终归属。

 

通过使用 LC-HRMS 方法，我们对 enocianina 进行了详细的定性和半定量分析，结果表明 enocianina 是一种富含多酚的提取物，其中花青素代表了重要但不是最具代表性的类黄酮类别。 Enocianina被发现具有直接（自由基清除作用）和间接（Nrf2激活）抗氧化活性，后者与儿茶酚成分有关。

 

最后，所有测试的 enocianinas 都显示出抗炎活性，发现这种活性与多酚含量严格相关，这不仅可以通过自由基清除和 Nrf2 激活来解释，还可以通过与非儿茶酚多酚相关的其他机制来解释。

 

总之，enocianina 是一种具有抗氧化和抗炎作用的高价值植物化学物质的混合物，涉及儿茶酚和非儿茶酚衍生物 

 

【1】Della Vedova, L.; Ferrario, G.; Gado, F.; Altomare, A.; Carini, M.; Morazzoni, P.; Aldini, G.; Baron, G. Liquid Chromatography–High-Resolution Mass Spectrometry (LC-HRMS) Profiling of Commercial Enocianina and Evaluation of Their Antioxidant and Anti-Inflammatory Activity. Antioxidants 2022, 11, 1187. https://doi.org/10.3390/antiox11061187

 

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