【摘要】 负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术。

项目简介   

负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术。用于观察样品中的颗粒性物质或生物大分子。用金属盐(如磷钨酸钠、醋酸铀等)对铺展在载网上的样品进行染色，使整个载网都铺上一层重金属盐，而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。由于电子密度高的重金属盐包埋了样品中低电子密度的背景，增强了背景散射电子的能力以提高反差，在图像中背景是黑暗的，而未被包埋的样品颗粒则透明光亮，这种染色方法称为负染技术。负染色是只染背景而不染样品，与光学显微镜样品的染色正好相反。目前最常用的负染液是醋酸铀或者磷钨酸，此外甲酸铀、硅钨酸、钼酸铵等也常作负染色剂用。

结果展示

图1. I和II负染色制样后观察到细胞培养提取的外泌体

服务流程

1.将样品取出10 μL。

2.吸取样品10 μL滴加于铜网上沉淀1 min，滤纸吸去浮液。

3.醋酸双氧铀10 μL滴加于铜网上沉淀1 min，滤纸吸去浮液。

4.常温干燥数分钟。

5.80-120 kv进行电镜检测成像。

6.获得透射电镜成像结果。

常见问题

1.样品需要怎么准备?

液体样品提供100-200μl，提供合适的浓度（上机前直接滴加样品，不做稀释或浓缩）；粉末样品20mg左右，并告知配置比例。

2.样品需要如何寄送？

根据样品的保存条件，常温保存可直接寄送；4℃保存可以加2-3个冰袋寄送，冰袋一定不要直接接触样品管，用泡沫包裹样品，避免样品结冰，注意冰袋融化不要弄湿预约单、样品管上编号，编号需要按照送样单上的编号，尽量简化编号。

如果是外泌体样品需要干冰寄送，干冰消耗量以每天7kg/d计算，保证足够量的干冰。

 

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